收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

以金磁微球为载体的H5N1 AIV免疫PCR检测方法的建立

邓明俊  肖西志  朱来华  辛学谦  郑小龙  王群  张彦明  
【摘要】:【目的】将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立快速检测低浓度H5N1禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的免疫PCR方法。【方法】以pUC19为模板,采用5′端标记有生物素的引物进行PCR扩增,制备含有生物素的报告DNA分子。以金磁微球为固相吸附载体,通过亲和素-生物素的桥联作用,将含有生物素的报告DNA分子与生物素标记的抗AIVH5N1血凝素蛋白的检测抗体分子连接,H5N1AIV与检测抗体结合后,体外扩增报告DNA,间接放大低含量病毒信号,建立可有效检测微量H5N1AIV的免疫PCR方法。对建立的免疫PCR方法的最适报告DNA浓度、最适链亲和素工作浓度、灵敏度和特异性进行确定和评价。【结果】建立的免疫PCR方法最适报告DNA质量浓度为1ng/mL,最适链亲和素工作质量浓度为20ng/mL,该方法可成功检测到10-4EID50/mL的H5N1AIV,而且特异性良好。【结论】建立的以金磁微球为吸附载体的免疫PCR是一种灵敏度高、特异性好的检测微量H5N1AIV的方法。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 沈志强;王金良;郭显坡;王晓虎;汪明;赵德明;;SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测猪细小病毒方法的建立及初步应用[J];中国兽医学报;2011年01期
2 张洁;于颖;徐桂花;;肉制品中亚硝酸盐的检测方法及替代物研究[J];农业科学研究;2010年02期
3 黄春丽;黄和;刘文侠;高平;黄国方;李志清;陈宏;罗林;;三聚氰胺的毒性残留及检测方法研究进展[J];南方水产科学;2011年03期
4 梁榕旺;徐淑莉;王潍波;顾小卫;秦韬;韩庆广;张骞;罗四维;;饲料中三聚氰胺的毒性及检测方法研究进展[J];粮食与饲料工业;2008年11期
5 丁美芳;;饲料中三聚氰胺及检测方法的研究[J];饲料研究;2009年09期
6 马贵平,李炎鑫,赵德明;疯牛病(BSE)的检测方法[J];中国动物检疫;2005年04期
7 成亚宁,王玉芬,王俊霞;盐酸克伦特罗的残留危害及检测方法[J];中国畜牧杂志;2005年10期
8 徐少平;;盐酸克伦特罗(CL)(瘦肉精)的危害与检测方法[J];吉林农业科技学院学报;2006年04期
9 王彦娟;靳烨;云战友;;牛乳中农药残留的安全性检测[J];乳业科学与技术;2007年03期
10 李振权;;浅谈食品微生物的检测方法[J];现代农业科技;2007年10期
11 魏淑英山东省潍坊市畜牧检测中心;张启迪;刘焕奇;王斌;潘宗海;;巢式PCR技术在猪瘟病毒检测中的应用[J];畜禽业;2008年05期
12 祝璟琳;王国良;;养殖大黄鱼弧菌病检测研究进展[J];水利渔业;2008年03期
13 郝贵增;龙淼;;肉类食品中兽药残留快速检测研究进展[J];肉类研究;2008年06期
14 刘友序;;卤虫卵质量检验方法[J];盐业与化工;2009年01期
15 郭天芬;牛春娥;高雅琴;李维红;;动物纤维、毛皮检测方法对比分析[J];经济动物学报;2009年02期
16 罗晓琴;张春叶;;阿维菌素类药物残留检测方法的研究进展[J];现代农业科技;2009年15期
17 王向鹏;张兴娟;孙元;李娜;贺番;常天明;李宏宇;杨增岐;仇华吉;;六种检测猪瘟病毒方法的比较[J];微生物学报;2010年08期
18 崔剑;;“拖拉机液压系统静态检测方法”课题通过鉴定[J];北京农业机械化学院学报;1985年04期
19 陈海林;;小型潜水电泵零件止口圆度的简便检测方法[J];排灌机械;1987年05期
20 Thomas M.Brown;高希武;;杀虫剂抗性检测技术的新进展[J];植物医生;1988年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郑申西;刘巧;陈柯星;郑艳影;;食品中苏丹红染料的GC-MS/MS检测方法[A];2005年全国有机质谱学术交流会论文集[C];2005年
2 朱一川;张晶;;P-5L_2C型微电脑数字粉尘仪及光散射法在劳动作业场所粉尘监测中的应用[A];加入WTO和中国科技与可持续发展——挑战与机遇、责任和对策(下册)[C];2002年
3 姚青;蔡子颖;樊文雁;;天津冬季PM_(10)和PM_(2.5)污染特征分析[A];第27届中国气象学会年会大气物理学与大气环境分会场论文集[C];2010年
4 王京丽;张远航;邵敏;曾立民;;北京市PM2.5质量浓度与能见度关系初探[A];中国气象学会2005年年会论文集[C];2005年
5 孟昭阳;张怀德;林伟立;颜鹏;王雁;蒋晓明;闫世明;梁丽明;;太原地区冬春季PM_(2.5)污染特征及影响因素[A];中国气象学会2006年年会“大气成分与气候、环境变化”分会场论文集[C];2006年
6 韩道文;刘文清;张玉钧;陆亦怀;刘建国;赵南京;;影响气溶胶质量浓度垂直分布的气象因素分析[A];光子科技创新与产业化——长三角光子科技创新论坛暨2006年安徽博士科技论坛论文集[C];2006年
7 杨磊;;尼尔基水利枢纽沥青混凝土心墙施工现场质量控制[A];2004水利水电地基与基础工程技术[C];2004年
8 李吉平;刘文森;徐静;万家余;高宏伟;;高效液相色谱(HPLC)对葡萄球菌肠毒素A、B检测方法的研究[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
9 汪凡文;罗丽华;张伟;;公路填石路堤的施工工艺与检测方法[A];计算机模拟与信息技术会议论文集[C];2001年
10 李张明;练继建;;大体积混凝土质量无损检测方法研究[A];中国地球物理学会年刊2002——中国地球物理学会第十八届年会论文集[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郭永超;噬菌体展示介导的免疫扩增病原检测方法研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2007年
2 邓明俊;免疫PCR检测低含量H5N1禽流感病毒方法的建立及初步应用[D];西北农林科技大学;2010年
3 李靖;同一人源H5N1禽流感病毒株中大、小斑病毒致病性差异研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年
4 赵春霞;基因序列变异分析的方法研究及其临床应用[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2004年
5 胥韦;H5N1禽流感病毒HA蛋白的免疫损伤致病机制研究[D];广州医学院;2009年
6 王鑫;黄土高原地区沙尘气溶胶的综合观测研究[D];兰州大学;2009年
7 顾芳;单粒子光散射法测量悬浮颗粒物质量浓度的理论模型及应用[D];南京理工大学;2008年
8 牛生杰;沙尘气溶胶微结构及其对降水影响的观测和数值模拟研究[D];南京气象学院;2004年
9 孙秀兰;食品中黄曲霉毒素B_1金标免疫层析检测方法研究[D];江南大学;2005年
10 林岭;运动性心理疲劳的概念模型、多维检测、影响因素及干预措施[D];北京体育大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张青霞;免疫PCR检测抗p53蛋白抗体在乳腺癌诊断中的应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
2 李艳鹏;电压跌落检测方法与控制技术的研究[D];西南交通大学;2007年
3 陈莹;水果中苯并咪唑类农药检测方法和残留现状研究[D];中国农业科学院;2008年
4 马玉婷;转Xa21基因抗病水稻抗优97特异性检测技术研究[D];中国农业科学院;2008年
5 陈佳;应用蛋白芯片和免疫PCR技术高效检测汉滩病毒的研究[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2005年
6 张琳;抗人APRIL单克隆抗体的制备及三种免疫检测方法灵敏度的比较[D];中国协和医科大学;2007年
7 唐漫书;猪白细胞介素-6基因的原核表达及免疫检测研究[D];四川大学;2002年
8 张先青;全自动引线键合机产品检测方法的研究[D];华中科技大学;2004年
9 郭建顺;鸡痘病毒分子生物学检测方法的建立及其致病机理研究[D];吉林大学;2005年
10 刘凤;尿中苯丙胺类毒品及打印机喷墨中环境有害物质的检测方法研究[D];首都师范大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张秀萍;WADA寻求EPO简易检测方法[N];中国体育报;2001年
2 国家外来运动疫病诊断中心 李林 刘雨田 李金明 陈义平 王志亮;规避疯牛病巨大风险的技术支撑[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 中国农业科学院 吕小文 李军国 秦玉昌;守护公共安全,技术手段须“精制配伍”[N];中国畜牧兽医报;2006年
4 关键 记者  彭溢;一项技术年创汇11万美元[N];黑龙江日报;2007年
5 闻泽;原料乳与乳制品中三聚氰胺 检测方法国家标准出台[N];中国电子报;2008年
6 史玉成;我国电梯节能有了技术支撑[N];中国质量报;2008年
7 高丽萍;花生油掺假检测方法概述[N];中国食品质量报;2009年
8 四川 钟荣;再议光耦合器的检测方法[N];电子报;2005年
9 深检;纺织品检测方法取得重大突破[N];中国国门时报;2006年
10 记者 张忠霞;美研究人员用新方法检测术后肺癌复发[N];人民日报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978