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体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化

孙凤杰  佟德民  卢小炎  董文斌  邓长柏  
【摘要】:目的探讨体外培养胎鼠心肌细胞方法的优化。方法取孕19日SD胎鼠分离心肌细胞进行原代培养,采用0.8 g/L胰蛋白酶和0.4 g/L 2型胶原蛋白酶联合消化后,以多次差速分离,不同种类的动物血清(胎牛血清组、马血清组)改良心肌细胞培养条件。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态及搏动频率、免疫荧光细胞化学染色分别检测α-横纹肌辅肌动蛋白(α-SA)与心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)鉴定胎鼠心肌细胞及培养24、48、72、96 h的心肌细胞纯度。结果心肌细胞接种24 h,可见大部分贴壁细胞和少量的悬浮细胞,亦见少许搏动的心肌细胞;48、72、96 h,马血清组心肌细胞α-肌动蛋白及cTnⅠ阳性率明显高于胎牛血清组。结论采用胰蛋白酶和2型胶原蛋白酶联合消化和马血清更易培养出胎鼠心肌细胞。

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