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抗哈维氏弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其特性鉴定

郝贵杰  沈锦玉  曹铮  潘晓义  
【摘要】:目的:研制抗哈维氏弧菌特异性单克隆抗体(mAb)并进行免疫学特性分析。方法:以哈维氏弧菌GYC1108-1颗粒性抗原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,5次免疫后取其脾细胞与Sp2/0-Ag-14骨髓瘤细胞融合。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,并鉴定mAb特异性及敏感性。结果:各株阳性克隆经3次亚克隆后,共获得5株抗GYC1108-1的mAb,其中1B7的细胞上清及腹水效价分别为1∶3 200和1∶32 000,交叉反应结果表明1B7除了与测试的多株哈维氏弧菌发生反应外,还与溶藻弧菌、麦氏弧菌和副溶血弧菌发生免疫交叉反应,但不与拟态弧菌、鳗弧菌、嗜水气单胞菌等发生交叉反应。ELISA检测1B7腹水对GYC1108-1的敏感性达107/L。结论:制备的抗哈维氏弧菌mAb可为哈维氏弧菌的检测及防治等提供有用的试剂。

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