收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

线粒体损伤在镉诱导肝细胞凋亡和DNA损伤中的作用

张玉静  蒋妮  柳强  朱勇飞  黄昕  
【摘要】:目的探讨活性氧(reactive oxidative species, ROS)介导的线粒体损伤在镉(cadmium, Cd)暴露诱导肝L02细胞凋亡和DNA损伤中的作用。方法以肝L02细胞为研究对象,利用0~90μmol/L的Cd处理细胞24 h,采用噻唑兰法检测Cd暴露对细胞生存率的影响;以0、20和40μmol/L的Cd染毒细胞24 h,分别采用克隆形成实验、流式细胞术、彗星实验、2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐非标记性氧化敏感的荧光探针、线粒体红色荧光探针(Mitotracker Red CMXRos)和10-N-壬基-吖啶橙等荧光探针标记、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)、ATP测定试剂盒以及Western Blot等方法,检测Cd暴露对细胞克隆形成能力、细胞凋亡、DNA损伤、ROS水平、线粒体形态、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP/Δψm)、线粒体质量、ATP含量及相关蛋白的影响;利用90μmol/L抗氧化剂维生素C预处理细胞1 h后给予40μmol/L Cd处理细胞24 h,检测ROS水平、Δψm、线粒体质量、ATP含量、细胞凋亡、DNA损伤及相关蛋白的改变。结果随Cd处理浓度的增高和处理时间的延长,肝L02细胞存活率显著降低,克隆形成实验结果显示,与对照组相比,20和40μmol/L Cd处理组的克隆形成率分别为8.23%和6.17%,细胞凋亡率分别为15.85%和26.26%,且B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)基因的蛋白水平显著降低,Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)和激活型半胱天冬蛋白酶-3(cleaved cysteine aspastic acid-specific protease 3, cleaved-caspase-3)蛋白水平呈剂量依赖性升高,Cd处理还可诱导细胞DNA损伤的发生以及细胞内ROS的大量蓄积,伴随线粒体颗粒状改变、Δψm、线粒体质量、ATP含量和线粒体细胞色素C(cyt c)的显著降低及胞浆cyt c的表达增高(P0.05);此外,与单独Cd处理组相比,维生素C预处理不仅能够显著增高Δψm、线粒体质量、ATP含量和线粒体cyt c,降低胞浆cyt c的表达(P0.05),还能够减轻Cd诱导的细胞凋亡和DNA损伤。结论 Cd暴露可诱导细胞内ROS的蓄积,进而引起线粒体功能障碍,最终导致细胞凋亡和DNA损伤的发生。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前19条
1 肖茜文;王艳蕊;刘桐;刘爽;何苗;任大勇;陈萍;;沙门氏菌和金黄色葡萄球菌DNA提取方法的比较[J];农产品加工;2017年03期
2 刘俊晓;王孟丽;王战会;;铅污染区儿童外周血淋巴细胞DNA损伤与血铅水平的相关性分析[J];中国实用医药;2016年10期
3 海峰;;吸烟会造成DNA突变并触发基因损害[J];科学大观园;2016年23期
4 赵琳娜;陈薛钗;钟儒刚;;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤的方法及进展[J];生物学杂志;2013年03期
5 尤媛媛;杨雯;姚武;郝长付;;煤工尘肺患者循环DNA的提取鉴定及应用[J];河南医学研究;2012年01期
6 徐义刚;崔丽春;李丹丹;刘忠梅;李苏龙;张子群;张国财;;食品中单核细胞增生李斯特菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立[J];食品科学;2012年16期
7 刘紫辉;姚武;郝长付;尤媛媛;;煤工尘肺患者循环DNA的提取鉴定及应用[J];医药论坛杂志;2011年07期
8 张国文;汪佳蓉;杨佳;;三聚氰胺对DNA潜在损伤作用的研究[J];分析试验室;2010年02期
9 李卫红;李清钊;姚林;;纳米偏钒酸钠的DNA损伤研究[J];中国工业医学杂志;2010年02期
10 冯爱娟;;DNA疫苗在预防禽流感病毒的应用进展[J];科技资讯;2009年31期
11 周志衡;雷毅雄;王彩霞;王敏;;氯化镉恶性转化16HBE细胞过程中DNA损伤的研究[J];中国热带医学;2007年11期
12 邢彩虹;纪之莹;李桂兰;尹松年;;DNA损伤修复能力与慢性苯中毒关系研究[J];卫生研究;2006年04期
13 刘密凤;姜昕;姚红菊;;黄绿青霉素致心肌细胞DNA损伤观察[J];中华劳动卫生职业病杂志;2006年03期
14 宋远志;对硝基苯酚与杂交中DNA的相互作用[J];中国公共卫生;2005年01期
15 吴成秋,张朝晖,李东阳;烹调油烟冷凝物对DNA链损伤作用的实验研究[J];中国公共卫生;2002年02期
16 张国栋,吴笛,孙立伟,封少龙,陈源高,孔志明,刘征涛;烷基酚类化合物对人外周血淋巴细胞DNA损伤的研究[J];南京大学学报(自然科学版);2002年04期
17 王起恩,顾志刚,韩春华,柳德米拉·曲路,吴卫东,神山宣彦,刘世杰;人造矿物纤维对细胞DNA损伤作用的体外研究[J];中华劳动卫生职业病杂志;1999年01期
18 段蓉芳,杜泽吉;DNA相对含量与抗辐射菌辐射抗性间的关系[J];苏州医学院学报;1999年05期
19 孙景明;青少年接种DNA重组乙型肝炎疫苗的效果[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;1993年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘青杰;李玉文;封江彬;陆雪;陈德清;;电离辐射诱导人线粒体DNA缺失和基因表达的初步研究[A];中国毒理学会第五次全国学术大会论文集[C];2009年
2 李旸;逯贵祯;;手机辐射的分米波与人体内DNA分子作用的研究[A];2009年全国微波毫米波会议论文集(下册)[C];2009年
3 ;EFFECTS OF Ku70-DEFICIENT ON ARSENITE-INDUCED DNA DOUBLE STRAND BREAKS, CHROMOSOMAL ALTERATIONS AND CELL CYCLE ARREST[A];海峡两岸第三届毒理学研讨会论文摘要[C];2005年
4 张幸;洪长福;娄金萍;周华仕;;用单细胞凝胶电泳法检测人造矿物纤维对DNA的损伤[A];浙江省医学科学院建院55周年院庆论文专辑[C];2005年
5 鹿晓晶;王惠芳;高川;李丽琴;;二苯氯胂的细胞毒性及其对细胞DNA的损伤作用[A];中国毒理学会第四届全国学术会议论文(摘要)集[C];2005年
6 Shinichiro FUKUYAMA;Daizhou ZHANG;;Evaluating The Potential of DNA Damage Caused by Airborne Particualte Matter by Introduction of Target and Hit Theory —a Case Study at Southwestern Coast of Kyushu in 2014[A];第十八届中国科协年会——分12 大气雾霾及PM2.5控制先进技术研讨会(国际)论文集[C];2016年
7 朱宏翔;胡建安;武越;黄云;熊敏如;;人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导的4-氨基联苯活化及DNA损伤[A];湖南省预防医学会劳动卫生专业委员会2009年学术交流会议论文集[C];2009年
8 张丽荣;魏泉德;林毅雄;谭爱军;郑予柯;方艳梅;肖慧洁;;食源性致病菌96微孔板DNA诊断芯片的研制[A];新发传染病研究热点研讨会论文集[C];2013年
9 王小娟;朱震;邓晗依;李春春;安艳;;线粒体DNA在砷致人支气管上皮细胞毒性中的作用[A];中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛论文集[C];2015年
10 李瑛;王全凯;董琳;王安娜;谢广云;孙金秀;许建宁;;甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化相关DNA修复基因表达改变的研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱守民;氯乙烯致DNA损伤的遗传易感性研究[D];复旦大学;2004年
2 曹锋;镉对DNA代谢的影响和大豆异黄酮的保护作用[D];复旦大学;2006年
3 邵华;甲醛和苯乙烯DNA加合特性及生物标志物的研究[D];山东大学;2007年
4 牛丕业;热休克蛋白70在紫外线致DNA损伤与修复中的作用[D];华中科技大学;2006年
5 张凤梅;石英致DNA双链断裂修复的DNA-PKcs/JNK/p53信号转导通路[D];中国疾病预防控制中心;2009年
6 陈红君;吸烟诱导DNA损伤的体外评价技术及抗DNA损伤天然保护剂筛选[D];复旦大学;2010年
7 李远;亚砷酸钠所致人皮肤角质细胞恶性转化和DNA损伤的分子机制研究[D];南京医科大学;2013年
8 张光辉;DNA甲基化及关联基因突变对苯作业工人遗传损伤的调控[D];复旦大学;2014年
9 王娟;杂色曲霉素对永生化和原代培养人食管上皮细胞DNA损伤作用及细胞周期影响的研究[D];河北医科大学;2013年
10 张笑;柴油机尾气暴露所致DNA甲基化改变及其与微核组学指标间的关联性研究[D];中国疾病预防控制中心;2016年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 林茜;基于DNA银纳米簇和氧化石墨烯检测水中痕量金属离子的研究[D];南华大学;2019年
2 马亚云;聚AT碱基双链DNA增强组蛋白抗菌活性的研究[D];陕西师范大学;2019年
3 傅晔;H19/SAHH调控OGG1甲基化对BaP致人肺源性细胞DNA氧化损伤的影响[D];山西医科大学;2019年
4 赵永东;机动车PM_(2.5)对EA.hy926细胞的毒性及DNA甲基化损伤效应[D];内蒙古科技大学包头医学院;2016年
5 高海洋;镉与大沟中胸腺嘧啶结合引起的DNA变性[D];内蒙古农业大学;2017年
6 滕倩;叶黄素补充对人体DNA损伤及抗氧化功能影响的研究[D];青岛大学;2016年
7 陈军;单细胞凝胶电泳检测洛克沙胂对中国仓鼠肺细胞的DNA损伤[D];扬州大学;2008年
8 张全喜;沙尘暴细颗粒物的DNA损伤及氧化应激作用[D];山西大学;2006年
9 韩东方;胆红素致神经细胞损伤及全基因组DNA甲基化水平变化的实验研究[D];兰州大学;2015年
10 于欣;喹乙醇诱导胰岛细胞DNA损伤及其机制探讨[D];大连医科大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前6条
1 田学科;酶萎靡 DNA伤难愈[N];中国中医药报;2003年
2 记者 房琳琳;DNA新技术可筛查新生儿193种疾病[N];科技日报;2018年
3 田学科;以色列科学家发现吸烟导致肺癌的机理[N];科技日报;2003年
4 张正棋;漫话茶多酚的保健功能[N];中国食品报;2009年
5 梅子;期待从今天开始[N];医药经济报;2001年
6 佩仙;维C过量可能致癌[N];山西经济日报;2001年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978