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基于高通量解析和可培养技术的白蔹内生真菌类群分析及分离菌株的抗痤疮致病菌活性

李鉴滨  张增峰  谭绮雯  陈美琪  姚华雄  邓祖军  
【摘要】:【背景】药用植物蕴含丰富的内生真菌类群资源,且内生真菌可产与宿主相关的次级代谢产物,具多种生物活性,是活性化合物生产的潜在经济替代来源。【目的】分析药用植物白蔹根部内生真菌的物种多样性,并筛选出具抗痤疮致病菌活性的目标菌株。【方法】基于高通量和组织分离法分析白蔹内生真菌的类群结构多样性;通过琼脂扩散法对内生真菌代谢产物的抗痤疮致病菌活性进行筛选;以微量肉汤稀释法测定代谢产物的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。【结果】高通量测序多样性分析结果显示,白蔹根部内生真菌可注释到8门22个纲45目73科93属,根部的优势属为Tainosphaeria属(20.86%)和镰刀菌属(Fusarium,15.38%)。基于组织分离法一共从白蔹根部分离获得83株内生真菌,隶属于12个属,其中青霉属(Penicillium,24.10%)、木霉属(Trichoderma,14.46%)、背芽突霉属(Cadophora,13.25%)、镰刀菌属(Fusarium,12.05%)为其主要类群。17株代表性菌株的抗痤疮致病菌活性检测结果显示对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌具拮抗活性的菌株分别占总数的11.76%和23.53%,其中内生真菌Fusarium oxysporum BLR17的发酵液对2种病原菌均具明显的抑菌效果,其发酵液的乙酸乙酯粗提物对痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为7.81 μg/mL和62.5 μg/mL,MBC值分别为7.81 μg/mL和62.5 μg/mL。【结论】白蔹内生真菌具有较为丰富的多样性,也蕴含着一定比例的抗痤疮活性的菌种资源,其中Fusarium oxysporum BLR17有望成为抗痤疮先导化合物筛选的资源菌株,值得进一步研究。

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