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大肠杆菌表达Trx-rPA融合蛋白的复性纯化

易进华  谭靖伟  张元兴  
【摘要】:大肠杆菌高密度发酵以包涵体形式表达融合蛋白Trx-rPA,表达量22%。包涵体蛋白洗涤后经金属螯合层析纯化,纯度达80%以上。经胱氨酸衍生,以脉冲加样形式复性,复性率可高达30%。经ETI-Sepharose纯化,复性的融合蛋白生物活性可达3.5×105IU/mgPr.。融合蛋白可被rEK酶切释放rPA,酶切效率达85%以上。酶切液经IDA-Sepharose和SP-Sepharose层析纯化,rPA纯度达98%以上,生物活性50万IU/mgPr.。1L发酵液经分离、复性及纯化后,可得高纯度rPA300mg以上。

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1 易进华;谭靖伟;张元兴;;大肠杆菌表达Trx-rPA融合蛋白的复性纯化[J];微生物学通报;2007年02期
2 易进华;吴劲松;张元兴;;重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的复性纯化[J];中国医药工业杂志;2007年05期
3 易进华;王罗春;张元兴;;重组肠激酶酶切Trx-rPA融合蛋白的研究[J];中国医药工业杂志;2007年06期
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