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千金苇茎汤含药血清对香烟烟雾暴露小鼠脾Naive T细胞Th17/Treg分化及Notch通路表达的影响

陈新军  田涛  薛辉  刘丹平  
【摘要】:目的旨在实验观察千金苇茎汤(Phragmitis Decoction, PD)大鼠含药血清对香烟烟雾水溶液处理的小鼠脾Naive T细胞分化Th17/Treg平衡及Notch信号通路表达的影响。方法将雄性健康SD大鼠30只随机分为A和B组(生理盐水5 ml/kg·bw)、C组(100 mg/kg·bw乙酰半胱氨酸)、D组(10 g/kg·bw PD血清)、E组(5 g/kg·bw PD血清)、F组(2.5 g/kg·bw PD血清),每日灌胃2次,连续3 d。末次给药1 h后,股动脉取血制备含药血清,高效液相色谱法(HPLC)含药血清浓度。用免疫磁珠分选C57BL/6雌性健康小鼠脾Naive T细胞,通过细胞培养后将其分为6组,分别标记为空白组(接受体积无药血清DMEM培养)、模型组(接受5.0%香烟烟雾水溶液的DMEM培养)、西药血清干预组(接受含乙酰半胱氨酸血清培养)、PD高剂量血清干预组(接受含高剂量PD血清培养)、千金苇茎汤中剂量血清干预组(接受含中剂量PD血清培养)、PD低剂量血清干预组(接受含低剂量PD血清培养)。流式细胞技术检测各组Naive T细胞Th17/Treg数量及比率变化。Western blot检测Naive T细胞Notch、Jagged-1、Jagged-2、Delta-like-1、Delta-like-3和Delta-like-4等蛋白表达。采用ELISA法检测各组中Naive T细胞培养液IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β的含量。结果 PD高剂量血清干预组及西药血清干预组Th17细胞相对数量明显低于模型组(P0.05),PD高剂量血清干预组Th17细胞相对数量明显低于西药组(P0.05)。PD高和中剂量血清干预组及血清西药干预组Treg细胞相对数量明显高于模型组(P0.05)。PD高剂量血清干预组Delta-like-1、Delta-like-3和Delta-like-4表达明显低于模型组(P0.05),PD高剂量血清干预组Jagged-1和Jagged-2的表达水平明显高于模型组(P0.05),也明显高于西药血清干预组(P0.05)。PD高和中剂量血清干预组及西药血清干预组的IL-17表达明显低于模型组(P0.05);PD高和中剂量血清干预组IL-17表达明显低于西药血清干预组(P0.05)。PD高剂量血清干预组IL-6表达明显低于模型组(P0.05);PD高和中剂量血清干预组TGF-β表达低于模型组(P0.05)差异均有统计学意义,各组IL-10表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PD具有防治香烟烟雾暴露引起的免疫损伤作用,发现其治疗机制可能是抑制Notch信号通路的激活,具体表现为通过下调该通路中相关受体、配体等蛋白的表达来调节小鼠NaiveT细胞向Th17/Treg的分化平衡,并能抑制IL-17、IL-6和TGF-β等炎性因子表达。

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