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IMC联合双内标PCR-ELISA定量检测结核分枝杆菌的方法

王国俭  
【摘要】:目的探究分析IMC联合双内标PCR-ELISA定量检测结核分枝杆菌的方法。方法结合研究需要,制备能特异性捕获结核分枝杆菌的免疫磁珠,继而运用结核分枝杆菌复合体群IS611序列及结核分枝杆菌Mtp40基因序列,设计2条与PCR扩增片段等长的内参照片段和2对特异性性引物、3套捕获探针。结果联合检测的全过程历时4h,检测限为5×103copies/m L,高内标模板浓度在8000~12000copies/m L,且低内标模板浓度在30~70copies/m L时,实际加入的目的模板浓度与计算出的浓度间呈线性关系(r?=0.998),无非特异性反应出现。结论 IMC联合双内标PCRELISA定量检测具备了特异、灵敏及快速、可定量的特点。

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