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HSPA13在ARPE19细胞氧化应激中的作用

李梦雯  吕亚莉  徐国彤  吕立夏  
【摘要】:目的探讨HSPA13在ARPE19细胞氧化应激中的作用。方法采用CCK8法检测不同浓度H2O2对ARPE19细胞活力的影响; Western印迹法和免疫荧光检测H2O2对HSPA13表达的影响; CCK8法检测HSPA13的表达水平对氧化应激诱导的细胞活力的影响;过表达或siRNA干扰HSPA13后,分别检测氧化应激相关指标和促炎因子的分泌; RNA测序分析空载组和HSPA13干扰组差异表达的基因,并进行GO富集及KEGG信号通路分析。结果 CCK8法结果显示,与H2O2空白对照组相比,100、200、300、400μmol/L H2O2处理组细胞活力降低(P0. 05)。Western印迹法结果显示,与H2O2空白对照组相比,H2O2处理组HSPA13的表达上升(P0. 05)。CCK8法结果显示,过表达HSPA13可保护细胞活力。氧化应激相关指标和促炎因子检测结果显示,与H2O2处理组相比,过表达HSPA13加H2O2处理组中SOD1和GPX1 mRNA表达上升,MDA含量降低,GSH含量上升,IL-8、IL-2和IL-1β分泌下降;而siRNA干扰HSPA13加H2O2处理组的结果则相反,并且活性氧类含量上升(P0. 05)。RNA测序结果显示,与空载组相比,HSPA13干扰组差异基因表达上调的有64个,下调的有254个。GO富集分析表明,HSPA13与细胞代谢或多种生理过程相关。KEGG分析显示,HSPA13与PI3K-Akt信号通路、TGFβ信号通路相关。结论氧化应激诱导ARPE19细胞中HSPA13的表达上调; HSPA13在细胞氧化损伤中发挥保护作用,这为寻找年龄相关性黄斑变性新的治疗靶点提供有益的线索。

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