基于UPLC-Q-TOF MS的广佛手指纹图谱建立及炮制前后成分差异分析

【摘要】：采用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF MS）建立生、制广佛手的指纹图谱，并通过化学模式识别方法分析两者的差异成分。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×150 mm×2.7μm)色谱柱进行分离，以0.1%甲酸+5 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，离子源为电喷雾电离源（ESI），在正、负离子模式下采集数据。根据分子离子峰精确质量数、二级谱图等信息，结合文献和化合物数据库并经标准品验证，共鉴定生、制广佛手中37个化学成分，包括：10个黄酮及黄酮苷类、4个香豆素类、12个有机酸类、5个糖苷类、2个柠檬苦素类及4个其它类。将采集的UPLC-Q-TOF MS数据整理并导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）”软件，分别建立生、制广佛手的指纹图谱，其中生广佛手确定了24个共有峰，识别和鉴定出19个峰成分；制广佛手确定了22个共有峰，识别和鉴定出14个峰成分。将数据预处理后，以SIMCA-P软件建立主成分分析（PCA）与正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）统计模型，分析生、制广佛手的差异成分。PCA结果显示生、制广佛手区分明显，表明生广佛手炮制后的化学成分发生变化；采用OPLS-DA法筛选显著性差异成分为：诺米林酸、5-异戊烯氧基-7-甲氧基香豆素、棕榈酸、油酸、水合氧化前胡素，其中5-异戊烯氧基-7-甲氧基香豆素的相对含量变化最显著，可作为区分生、制广佛手的化学标志物。该研究可为生、制广佛手的质量标准以及药效学研究提供数据支持。