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大鼠成牙骨质细胞的体外培养及其生物学特性的实验研究

张斌  李岩峰  
【摘要】:目的 :探讨体外培养源于大鼠磨牙牙骨质的成牙骨质细胞 (cementoblast ,CMB)的可行性 ,以期建立能排除牙周其它细胞干扰的CMB体外实验模型。方法 :使用组织块结合酶消化的二步法 ,分别培养来自牙骨质的CMB ,来自牙槽骨的成骨细胞 (osteoblast ,OB)和来自牙周韧带 ( periodontalligament ,PDL)的成纤维细胞。然后对所培养的细胞分别进行骨钙素免疫组化染色和碱性磷酸酶 (ALP)活力测定 ,并利用茜素红S ,检测在条件培养基下细胞形成矿化结节的情况。结果 :3种牙周细胞都可从约 12周大鼠第一磨牙根周获得进行原代培养。骨钙素在体外培养的CMB和成骨细胞中被强烈表达 ,在PDL成纤维细胞 (PDLC)中几乎不表达。成骨细胞ALP活性最强 ,在成纤维细胞中适中 ,在CMB中几乎无活性。CMB形成矿化结节茜素红S染色阳性。结论 :CMB可以在体外成功培养 ,并可与牙槽骨OB、PDLC相区别。CMB在形态和蛋白表达等很多地方与成骨细胞相似 ,如表达矿化相关蛋白等 ,但它几乎没有ALP活性 ;矿化条件下 ,能在体外形成矿化结节

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