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过表达miR-141对舌癌Tscca和Tca-8113细胞侵袭、迁移的影响

黄涛  刘慧  邵博  龚忠诚  
【摘要】:目的:研究过表达miRNA-141对舌癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:使用miR-141慢病毒Ubi-miR-141-SV40-EGFP-IRES-puromycin(miR-141组)和慢病毒空载体Ubi-MCS-SV40-EGFP-IRES-puromycin(miR-NC组)转染两组舌癌细胞系(Tscca、Tca-8113细胞系),未转染的细胞为空白组(Blank)。采用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-141基因表达,RT-qPCR和蛋白免疫印迹(Western blot)检测基质金属蛋白酶2、9(MMP2、9),E盒结合锌指蛋白2(zeb2)的mRNA和蛋白表达。结果:流式细胞术测定转染率,Tscca细胞中miR-141组转染率为82.4%、miR-NC组为87.3%;Tca-8113细胞中miR-141组转染率为73.4%、miR-NC组为89.1%。RT-qPCR结果显示:miR-141组中miR-141表达明显高于miR-NC组和Blank组,证明稳定转染的细胞株建立成功。Tscca和Tca-8113细胞中miR-141组和miR-NC组、Blank组组间比较,MMP2、MMP9、zeb2的mRNA和蛋白表达均降低。结论:在Tscca和Tca-8113细胞中通过过表达miR-141抑制细胞中MMP2、MMP9、zeb2的mRNA和蛋白表达来控制细胞迁移和侵袭能力。

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