长链人胰岛素样生长因子-1在毕赤酵母中表达条件的优化

【摘要】：目的优化长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)在毕赤酵母中的表达条件。方法考察甲醇诱导浓度(0.25%、0.50%、0.75%、1.00%、1.25%和1.50%)、诱导温度(25、28、30℃)、pH值(4.75、5.00、5.25、5.50、5.75和6.00)及添加剂(0.1%的精氨酸、甘氨酸、组氨酸、吐温-20和吐温-80)对LR3IGF-1在毕赤酵母中表达的影响,优化LR3IGF-1的表达条件。以最佳表达条件在发酵罐中诱导表达LR3IGF-1,检测其表达量,并与初始发酵条件的表达量进行比较。结果甲醇浓度为0.75%及诱导温度为25℃时,LR3IGF-1的表达量最高,分别为76.5和98 mg/L;pH值为5.25,诱导24 h,LR3IGF-1的表达量较高,且降解程度低;添加吐温-20可使LR3IGF-1的表达量提高至271 mg/L。以优化的条件进行发酵,LR3IGF-1的表达量可达497 mg/L,较优化前(52 mg/L)提高了近9倍,且诱导时间从48 h缩短至24 h。结论优化了LR3IGF-1在毕赤酵母中的表达条件,为其规模化生产奠定了基础。