人血清白蛋白和粒细胞集落刺激因子融合蛋白的克隆表达

【摘要】：构建重组人血清白蛋白粒细胞集落刺激因子(HSA-hG-CSF)表达载体,用毕赤酵母表达该重组蛋白。PCR扩增出人血清白蛋白基因(HSA)和粒细胞集落刺激因子基因(hG-CSF),GGGGS作为小肽接头,采用重叠PCR的方法将HSA和hG-CSF拼接起来,与质粒载体pPIC9K连接,转化大肠杆菌感受态细胞DH-5α。抽提质粒,用SalI酶切重组质粒,电转化法导入毕赤酵母SMD1168中,通过表型筛选和诱导表达实验得到蛋白表达工程菌。Western-blotting分析表明融合蛋白具有粒细胞集落刺激因子免疫原性。NFS-60细胞测活实验分析表明体外活性达到约4.0×107IU/mg。

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中国期刊全文数据库

前20条

1	丁正中;张璐;李涛;;氧化还原因子-1的原核表达纯化及其活性鉴定[J];浙江师范大学学报(自然科学版);2011年03期
2	曹赛;戴红梅;李树龙;谢迟;方宏清;;胸腺肽α1-Spl DnaX内含肽融合蛋白的切割动力学研究[J];生物技术通讯;2011年04期
3	王桂玲;王孝会;都田赵;陈薇;姜佩家;;原核表达载体GST-RUNX3的构建及其在大肠杆菌表达[J];解剖科学进展;2011年04期
4	袁丰瑞;张敏静;仝雷;苏志坚;项琪;黄亚东;;抗Her-2抗体与人β防御素Ⅱ融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定[J];中国药科大学学报;2011年03期
5	曹佳;丁丽华;范忠义;程龙;蒋凯;徐晓洁;韩永健;徐承水;叶棋浓;;核心组蛋白的融合表达和纯化[J];生物技术通讯;2011年04期
6	李安明;邓青云;李德华;;长喙田菁SrPCS1的原核表达及多抗血清的制备[J];江西农业大学学报;2011年04期
7	史晓燕;张莹莹;周晓巍;陆健昇;郭泽坤;黄培堂;;HBx-EGFP-TLM融合蛋白表达载体的构建、蛋白表达纯化及活性检测[J];生物工程学报;2011年09期
8	冯晓敏;卞颖华;徐伟;刘新建;朱进;管晓虹;;狂犬病毒G蛋白基因的克隆、表达及生物学活性鉴定[J];南京医科大学学报(自然科学版);2011年07期
9	张怡;周庆峰;贾孟;张红绪;李成伟;;GST-Exendin-4在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化[J];生物技术通报;2011年06期
10	井健;;抗栓胰岛素原钙调素重组融合蛋白表达条件的摸索[J];北京师范大学学报(自然科学版);2011年04期
11	冯莉莉;刘华雷;郑东霞;赵云玲;张维;张乐萃;王志亮;;1株鸭源Ⅰ类新城疫病毒分离株F和HN基因的分子特性分析[J];畜牧与兽医;2011年04期
12	雷培奎;;BPI基因融合蛋白的研究进展[J];畜禽业;2011年05期
13	郭艳荣;常晓月;崔晓君;魏勋斌;朱乃硕;;eEF1A1基因克隆、原核分泌表达及融合蛋白纯化[J];生物技术通报;2011年06期
14	马亚珍;兰玲;王涛;;一株鸡新城疫强毒株的分离及生物学特性鉴定[J];中国畜牧兽医;2011年09期
15	赵建乐;陈琛;闫茂仓;张小莺;李引乾;张三东;;牛β-防御素BNBD11基因在大肠杆菌中的表达[J];食品科学;2011年13期
16	甄诚;陈亮;柏兆方;王芊艺;满江红;;基于GST-pull down的小G蛋白Rac1活性检测体系的建立[J];生物技术通讯;2011年04期
17	狄春红;罗燕;杨磊;尹小菲;陈佳红;谭晓华;;细胞穿膜肽融合蛋白PEP1-vMIP-Ⅱ促进血管增生研究[J];中国药学杂志;2011年11期
18	陆月;刘丹;张孝任;刘雪荣;沈炜;郑刚;柳云帆;董小岩;吴小兵;高基民;;腺病毒载体介导的重组蛋白sTNFRII-gAD快速表达和制备[J];生物工程学报;2011年08期
19	乌吉斯古冷;汤睿智;邢万金;;Wistar大鼠Pdia3 cDNA的克隆及原核表达[J];生物技术通报;2011年09期
20	于超生;文忠;邹泽红;陈惠芳;陶爱林;;蛔虫过敏原ABA-1融合基因在大肠杆菌中的表达及鉴定[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期

中国重要会议论文全文数据库

前10条

1	王玉梅;刘畅;蒙冲;郭风云;;HEV ORF_2重组菌菌种的稳定性及融合蛋白的应用[A];新世纪新机遇新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年
2	杨燕凌;;酶(蛋白)融合技术研究[A];华东地区农学会学术年会暨福建省科协第七届学术年会农业分会场论文集[C];2007年
3	毛华;陈松森;狄旭;贾佩臣;梁植权;;重组人SCF-GM-CSF融合蛋白的克隆、表达及生物学活性研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
4	陈丽华;王强;侯万国;;不同链接剂修饰的融合谷胱甘肽活性的研究[A];中国化学会第十二届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2009年
5	蔡斌;林毅;薛偕华;方玲;吴志英;王柠;;TAT-Ngb融合蛋白的原核表达及其对小鼠脑缺血影响的研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
6	万兵;张利宁;李长菲;刘星霞;马春红;宋静;曹英林;孙汶生;;分泌型人4-1BB-hIgG1Fc融合蛋白真核表达载体的构建[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
7	于海鹏;刘丹;薛雁;盛军;;表达HBsAg及rhIFNa-2b融合蛋白的人参细胞株的建立[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
8	李国辉;梁英民;韩骅;何飞;康志杰;黄斯勇;徐恒;张丽;伍艳兰;牛晓丽;马长升;;融合蛋白hJagged1ext-Fc毕赤酵母表达载体的构建及表达[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
9	刘松财;王佳;孙铭泽;赵宇;;鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立[A];吉林省第六届生命科学大型学术报告会论文集[C];2008年
10	赖德辉;李逊;雷鸣;曾国华;袁坚;吴文起;何永忠;何朝晖;;基因工程构建表达融合蛋白GST-FCoAT的益生大肠杆菌Nissle1917-Frc[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库

前10条

1	柏亚铎;犬瘟热病毒、犬冠状病毒入侵宿主细胞机制研究[D];中国农业大学;2005年
2	王玉梅;嵌合降钙素基因的构建及表达[D];中国海洋大学;2005年
3	徐越驰;组氨酸为活性中心的蛋白质酪氨酸磷酸酶和细胞自噬标记物的研究[D];吉林大学;2010年
4	孟巧红;家蚕表达的绿色荧光蛋白标记的霍乱毒素B亚基与人胰岛素融合蛋白抗1型糖尿病的研究[D];浙江大学;2011年
5	彭明丽;人oGPCRs-Gi1α融合蛋白的表达及GPR80的功能初探[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
6	王春艳;组蛋白H4融合蛋白载体用于肿瘤基因治疗的研究[D];吉林大学;2010年
7	赵志平;光合细菌Rhodobacter sphaeroides新型异源蛋白表达体系的构建及其应用研究[D];重庆大学;2011年
8	任桂杰;副粘病毒F蛋白特异性膜融合功能的研究[D];山东大学;2005年
9	殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
10	袁莉刚;大鼠RSA14-44基因功能的初步研究[D];甘肃农业大学;2004年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	陈喆;幽门螺杆菌尿素酶B亚单位和细胞空泡毒素基因的克隆，表达和其融合蛋白免疫反应性的研究[D];浙江大学;2002年
2	万一;人TNF-α自体疫苗的研究[D];第四军医大学;2004年
3	逄媛;猪源产肠毒素性大肠杆菌K88、K99，987P、F41双基因串联表达的研究[D];山东农业大学;2008年
4	陈小颖;ω-芋螺毒素M ⅦA的表达与纯化[D];浙江大学;2004年
5	徐忠林;共表达NDV F 基因与H9亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力[D];扬州大学;2005年
6	王刚;志贺毒素B亚单位与柯萨奇病毒B组3型VP1融合DNA疫苗的构建及其免疫效果的观察[D];河北医科大学;2005年
7	刘楠;重组HSA/Tα1融合蛋白在毕赤酵母表达及纯化研究[D];吉林大学;2009年
8	梁桂芳;IER5原核表达载体的构建及融合蛋白表达、纯化[D];河北医科大学;2010年
9	白彦霞;营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究[D];首都师范大学;2000年
10	张丽青;TrxA-EstB1融合蛋白的表达、纯化与活性分析[D];山东农业大学;2003年

中国重要报纸全文数据库

前2条

1	记者白毅;我国发现SARS病毒借助胞膜“脂筏”进入宿主细胞[N];中国医药报;2008年
2	记者刘钢;黄病毒入侵细胞机理被揭示[N];新华每日电讯;2008年

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