收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

慢病毒介导的稳定表达人GM-CSF、IL-4的EA.hy926细胞株的建立

石晓月  贺敏  任鹏  宋丽雅  乔志新  杨晓琮  程宏  冯秋月  张公庆  王璇琳  宫宁  王字玲  李伟静  于群  
【摘要】:目的:获得能够稳定表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)的内皮细胞株。方法:构建重组慢病毒表达载体,在293FT细胞中进行病毒的包装,用获得的高滴度慢病毒感染EA.hy926细胞株,建立能够稳定、高效表达hGM-CSF、hIL-4的EA.hy926细胞株。结果:EA.hy926感染效率达90%以上,长期传代后阳性率仍维持在90%以上;实时定量PCR和ELISA方法证实感染后细胞hGM-CSF、hIL-4在mRNA水平的表达分别是未感染细胞的25倍和9946倍,在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的145倍和23倍。结论:构建的细胞系可以稳定表达细胞因子GM-CSF、IL-4。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李艳佳,齐凤英,左连富,张建慧;重组质粒pcDNA3.1-IL-15转染对小鼠骨髓DC上表面分子的表达及功能的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年02期
2 王良华,万军梅,熊文;人外周血树突状细胞的体外诱导培养[J];江西医学检验;2004年03期
3 朱学军,曹雪涛,于益芝,陈国友,万涛,马施华,唐华,章卫平;人外周血树突状细胞的体外扩增及鉴定[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1997年04期
4 周浩;陈专华;邢增术;王刚;罗志刚;秦国庆;李建军;钱坤;蒋鸿涛;王芳;王毅;廖端芳;;人FasL基因转染成熟树突状细胞对T淋巴细胞增殖和凋亡的影响[J];生物化学与生物物理进展;2011年04期
5 李用国,罗云萍,梁增伟,任红;人外周血树突状细胞的体外培养扩增[J];重庆医科大学学报;2001年01期
6 王国强,钟翠平,傅继东,范强,张新华,吴超群,顾云娣;小鼠肝癌总RNA转染的树突状细胞体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞的研究[J];中国免疫学杂志;2002年02期
7 张临友,张学峰;树突状细胞和免疫耐受[J];国外医学.免疫学分册;2002年05期
8 郭凯文,邱文洪,沈关心;IL-10在树突状细胞中的表达及效应研究[J];数理医药学杂志;2005年01期
9 徐彤,杨靖清,殷慧君,唐佩弦;mIL-12基因转染促进小鼠树突状细胞混合淋巴细胞反应[J];安徽医科大学学报;2000年02期
10 丁传林,姚堃,张天泰,周锋;IL-4对DC产生IL-12影响的研究[J];现代免疫学;2003年04期
11 苏华,郑秋红,何维;人外周血及脐血树突状细胞的体外分离培养[J];基础医学与临床;1999年04期
12 吴军,杨太成,赖晃文,王捷,郑文岭,王晓怀;癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞诱导CEA特异性T细胞免疫[J];肿瘤防治研究;2002年05期
13 吴军,杨太成,王晓怀,杨传红,赖晃文,王捷,郑文岭;人癌胚抗原重组痘苗病毒转染树突状细胞体外诱导的抗肿瘤免疫[J];中华微生物学和免疫学杂志;2003年01期
14 朱学军,曹雪涛,马施华,章卫平,鞠佃文,于益芝,陈国友;人骨髓、脐血CD34~+干细胞体外扩增的树突状细胞的表型及其T细胞刺激活性分析[J];中国肿瘤生物治疗杂志;1999年01期
15 吴刚,韩本立,裴雪涛;人树突状细胞体外提呈凋亡胆管癌细胞抗原的研究[J];第三军医大学学报;2000年02期
16 吴军,王晓怀,杨太成,冼江,郑文岭;经癌胚抗原重组痘苗病毒转染的树突状细胞体外诱导特异性T细胞免疫[J];第一军医大学学报;2002年03期
17 张新华,钟翠平;树突状细胞与移植免疫的研究进展[J];解剖科学进展;2003年01期
18 余森辉;曹以诚;;siRNA特异抑制树突状细胞BAK基因表达的研究[J];现代食品科技;2010年07期
19 吴刚,顾红光,韩本立,裴雪涛;γ射线诱导癌细胞凋亡致敏树突状细胞后的免疫应答[J];中华放射医学与防护杂志;2002年01期
20 朱雄鹏;陈志哲;林旭;胡建达;李纯团;杨婷;许贞书;吕璐璐;陈彩平;张浪辉;;存活蛋白重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞的表达[J];中国实验血液学杂志;2006年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张新华;钟翠平;顾云娣;顾晓;范强;王国强;周播江;;TGF-β1基因转染树突状细胞增强移植心脏耐受性并降低Fractalkine的表达[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年
2 陈帅;李浩博;李牧;李双;赵培林;;基于树突状细胞的肿瘤疫苗构建及其抗肿瘤效应研究[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年
3 尤长宣;罗荣城;张军一;苏瑾;廖旺军;郑航;Paul L Hermonat;;基因转移制备树突状细胞的实验研究[A];第一届中国肿瘤靶向治疗技术大会论文集[C];2003年
4 高立芬;孙汶生;马春红;张利宁;曹英林;刘素侠;梁晓红;刘玉刚;郭春;;pcDNA3-HBV瞬时转染对树突状细胞功能的影响[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
5 林贤凡;吴金明;陈瑾;孙慧;金思思;申苏建;;HBV S-ecdCD40L融合基因修饰对树突状细胞功能的影响[A];第二届浙江省消化病学术大会论文汇编[C];2009年
6 邱文洪;王国华;朱莉娟;沈关心;;基因修饰的树突状细胞的生物学效应研究[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年
7 樊彩斌;温端改;欧阳骏;侯建全;严春寅;浦金贤;李纲;农绍军;;编码IKK2dn重组腺病毒载体的构建及表达验证[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
8 刘修恒;;小鼠骨髓源性不同成熟度树突状细胞培养鉴定[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年
9 张庆红;胡玉珍;吕顺艳;钟延清;;雌激素影响大鼠树突状细胞的分化、成熟和功能[A];中国生理学会第六届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2003年
10 高跞;范华骅;聂晓绚;龚裕春;刘嬿;杨懿铭;高峰;;以总RNA转染的方式将Bcr-Abl抗原基因导入树突状细胞并表达特异性蛋白P210的实验研究[A];中国输血协会第四届输血大会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈玉丙;树突状细胞抗原负载及MAGE-3 DNA瘤苗研制[D];吉林大学;2004年
2 韩波;吲哚胺2,3二氧化酶在大鼠角膜移植排斥反应中的作用[D];华中科技大学;2007年
3 王正昕;肿瘤微环境中浸润性树突状细胞的表型和免疫学功能的研究及其临床意义[D];第二军医大学;2000年
4 潘建平;γ-干扰素对树突状细胞分化和功能成熟的调控及其基因修饰的树突状细胞抗肿瘤免疫机制研究[D];浙江大学;2002年
5 周向阳;新型热休克蛋白HSP-DC激活树突状细胞及其佐剂效应研究[D];第二军医大学;2003年
6 赵鸿;未成熟树突状细胞联合骨髓移植诱导大鼠异体肾移植免疫耐受的研究[D];复旦大学;2003年
7 高伟生;MAGE-A3多肽瘤苗对人乳腺癌细胞及裸鼠移植瘤免疫作用的实验研究[D];南方医科大学;2007年
8 朱伟国;PPAR-γ激动剂吡格列酮抑制血管紧张素Ⅱ诱导树突状细胞免疫激活致动脉粥样硬化斑块不稳定的研究[D];浙江大学;2010年
9 王宏伟;肺间质树突状细胞在多器官功能障碍综合征中的免疫激活与免疫耐受作用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
10 赵毅;青藤碱对RA患者树突状细胞免疫功能的影响及机制研究[D];第一军医大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王剑;尤文肉瘤细胞总RNA转染DC体外诱导肿瘤特异性CTL杀伤作用的研究[D];第四军医大学;2006年
2 吴军;树突状细胞(DC)的培养及CEA-重组痘苗病毒转染DC诱导的特异性T细胞免疫[D];第一军医大学;2002年
3 吴永友;人胃癌细胞RNA转染树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫的实验研究[D];苏州大学;2002年
4 李琤;肺癌细胞总RNA转染DC体外诱导肺癌患者抗瘤免疫的实验研究[D];天津医科大学;2002年
5 林丽燕;MAGE-A3慢病毒载体感染的树突状细胞对肿瘤细胞的特异性杀伤作用[D];福建医科大学;2011年
6 王东;树突状细胞诱导的抗腺样囊性癌免疫预防裸鼠移植瘤发生并抑制其生长的实验研究[D];天津医科大学;2006年
7 吴鸣宇;黑色素瘤基因(MAGE-1)相关肽负载树突状细胞对肝癌细胞杀伤作用的实验研究[D];苏州大学;2003年
8 刘铮;RNAi抑制Smad6并在TGF-β1作用下对小鼠骨髓源树突状细胞生物学特性变化的研究[D];重庆医科大学;2010年
9 孟冬梅;急性髓细胞白血病细胞来源的树突状细胞的诱导及功能研究[D];青岛大学;2003年
10 梁军利;IFN-β1a对多发性硬化树突状细胞分泌的细胞因子影响的研究[D];广西医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王雪飞;树突状细胞“面目”更清晰[N];健康报;2004年
2 章静波;干细胞研究新动向[N];健康报;2009年
3 记者 白毅;间充质干细胞可促进成熟树突状细胞增殖分化[N];中国医药报;2009年
4 吴军 杨太成;主动特异性免疫疗法治疗肿瘤[N];中国中医药报;2003年
5 方彤;树突状细胞瘤苗新进展[N];健康报;2006年
6 本报记者 沈湫莎;这一次,诺奖会不会颁给逝者[N];文汇报;2011年
7 张献怀;树突状细胞疗法治疗恶性黑色素瘤[N];中国医药报;2004年
8 记者 毛黎;美发现一种“超级”形态酶[N];科技日报;2006年
9 冯世容;CD95基因转染可提高胰腺癌对化疗药物敏感性[N];中国医药报;2001年
10 杨淑娟;美研究出新型丙型肝炎疫苗[N];中国医药报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978