烟草Nt4CL与虎杖PcSTS基因的融合表达与功能分析

【摘要】：4-香豆酰辅酶A连接酶(4-coumarate-Co A ligase,4CL)和芪合酶(stilbene synthase,STS)是白藜芦醇苯丙氨酸代谢合成的最后两个关键酶。运用悬挂PCR(overlap PCR)的方法将烟草4CL基因(Nt4CL)和虎杖STS基因(Pc PKS5)用3个中性氨基酸链连接,得到融合基因Nt4CL-Pc PKS5,将其插入原核表达载体中,构建p ET30a-Nt4CL-Pc PKS5重组质粒,表达Nt4CL-Pc PKS5融合蛋白。经Ni2+纯化和PD-10柱脱盐后,得到可溶性纯化蛋白。体外酶促反应结果表明该融合酶具有4CL和STS的双重活性,其催化产物为白藜芦醇。酶促反应最适条件为:p H 6.5,反应温度为45℃。研究结果获得了有效催化白藜芦醇生物合成的双功能融合酶,为进一步利用融合酶基因转化工程菌株实现白藜芦醇工业化生产奠定了基础。

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3	韩钰;王艳林;;小鼠精胺氧化酶的原核表达与鉴定[J];生物技术通讯;2007年01期
4	朱向前;杨静;丁晓然;王升启;;重组人磷脂爬行酶1的原核表达及纯化[J];生物技术通讯;2011年06期
5	哲名家;张淼涛;云涛;王玢瑸;刘光清;;兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2012年04期
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7	孙东波;冯力;刘杰;时洪艳;佟有恩;刘胜旺;童光志;;猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析[J];病毒学报;2006年02期
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11	宋海韬;王力刚;沈兴家;黄勇;赵巧玲;;家蚕丙酮酸脱氢酶激酶基因的克隆与原核表达[J];江西农业学报;2011年10期
12	张军;韩钰;蔡富强;秦烨;夏燕;王艳林;;人腺苷甲硫氨酸脱羧酶的原核表达及纯化[J];中国生物制品学杂志;2012年02期
13	薛亚军;赵耀东;董艳;蔡如珏;卢亦成;楼美清;;重组胶质细胞生长因子2蛋白的原核表达及纯化[J];生物医学工程与临床;2012年02期
14	江国春,袁丽珍,贾向旭;人睫状神经营养因子的克隆与原核表达[J];军事医学科学院院刊;1998年02期
15	袁志栋,王志亮,刘雨田,吴晓东,刘海生;水貂朊蛋白前体基因的原核表达[J];云南大学学报(自然科学版);2005年02期
16	吴利先;王国富;白丽;王晶;郭利军;;幽门螺杆菌粘附素基因的原核表达[J];大理学院学报(自然科学);2006年02期
17	金蕾;张慧珍;杨继要;赵向锋;王琳;吴逸明;;铁蛋白轻链的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备[J];第二军医大学学报;2007年11期
18	曹春雨;王艳林;任玉珊;韩钰;;小鼠钙网蛋白的克隆与原核表达[J];第四军医大学学报;2008年23期
19	巩新;唱韶红;刘波;吴军;;重组鼠干细胞因子的原核表达、纯化及生物活性初步分析[J];生物技术通讯;2009年03期
20	刘洪贵;杨颗粒;武瑞;王建发;张敏;林玉才;;金黄色葡萄球菌A蛋白的原核表达及其功能研究[J];中国兽医杂志;2009年10期

中国重要会议论文全文数据库

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7	袁志栋;王志亮;刘雨田;吴晓东;刘海生;;水貂朊蛋白前体基因的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
8	王士友;张耀洲;;一个新的家蚕基因的克隆、原核表达及纯化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
9	伍艳兰;黄斯勇;牛晓丽;张丽;陈茹菲;何飞;张萍;梁英民;刘利;;人Delta-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
10	马文涛;闫若潜;吴志明;刘光辉;盛敏;谢彩华;;猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库

前8条

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2	曹秀利;杨树PtCDD基因的原核表达及酶活分析[D];南京林业大学;2008年
3	黄新河;小鼠TAp63γ的原核表达、纯化、结构及功能初步研究[D];四川大学;2007年
4	张大鹏;VP60蛋白的原核表达、抗体制备及VP60基因转化的研究[D];西北农林科技大学;2012年
5	张少斌;豌豆肌动蛋白异型体（PEAc1）的原核表达及其藻荧光探针的研制[D];中国农业大学;2004年
6	尹国华;利用Red重组系统构建dsRNA原核表达体系抗烟草花叶病毒的研究[D];山东农业大学;2009年
7	韩凌霞;猪圆环病毒2型基因的原核表达与单克隆抗体的制备及感染性分子克隆的动物接种试验[D];中国农业科学院;2003年
8	于扬;重组人源GPx4及其模拟物的原核表达、结构与功能的研究[D];吉林大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	周鹏;结核分枝杆菌特异性蛋白的原核表达、纯化及免疫原性分析[D];安徽医科大学;2015年
2	高小磊;六种结核分枝杆菌特异性抗原的原核表达及16 KD-38 KD和Ag85A血清学诊断效果的研究[D];兰州大学;2015年
3	彭传林;家蝇抗真菌肽MAF-1原核表达体系优化与活性分析[D];贵阳医学院;2015年
4	钟树怀;猪囊尾蚴膜联蛋白的原核表达及其免疫反应性分析[D];贵阳医学院;2015年
5	孙明潭;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表达及ELISA方法的建立[D];河北农业大学;2015年
6	张良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表达及其在皮肤中的表达分析[D];西北民族大学;2015年
7	达小强;牦牛转铁蛋白基因克隆与原核表达[D];西北民族大学;2015年
8	高翠娥;飞蝗2个CYP450转基因果蝇品系对杀虫剂的敏感性及原核表达[D];山西大学;2015年
9	吴雨航;布氏杆菌病间接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要养殖地区鹿布病血清学调查[D];吉林农业大学;2015年
10	姜旭;百合无症病毒16kDα基因的克隆、原核表达及亚细胞定位[D];大连理工大学;2015年

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