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红三叶草提取物中四种异黄酮的HPLC检测方法

李彦军  郑楠  王加启  赵圣国  
【摘要】:本研究的目的是建立一种可以同时测定红三叶草提取物中大豆苷元、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆素A含量的高效液相色谱检测方法。采用χBridge C18(250 mm×4.6 mm,5μm,Waters)色谱柱,以甲醇(A)和10 mmoL磷酸氢二钠溶液(B)为流动相,流速为1 mL/min,进样量为10μL,在不同的洗脱梯度、检测波长和柱温下检测四种异黄酮的含量。确定了最佳色谱条件:柱温为40℃,检测波长为270 nm,洗脱梯度为:0~5 min,20%-40%A;5~20 min,40%~75%A;20~23 min,75%~100%A;23~26 min,100%A;26~26.5 min,100%~20%A;26.5~35min,20%A。结果表明:四种异黄酮在浓度为1~50μg/mL时具有良好的线性关系(R~20.999),保留时间稳定,精密度和稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于2%,加标回收率为96%~100.10%。建立的检测方法符合分析方法学评价的要求,可用于同时检测红三叶草提取物中的鹰嘴豆素A等四种异黄酮。

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