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重楼皂苷Ⅰ通过JNK信号通路诱导乳腺癌细胞凋亡和自噬

吕波  佟剑虹  
【摘要】:目的 探究重楼皂苷Ⅰ对乳腺癌细胞凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 用不同浓度的重楼皂苷(20、50、80、110、140μg·mL-1)处理乳腺癌细胞,细胞计数试剂盒(Cell counting kit,CCK-8)检测细胞增殖抑制率,筛选最适浓度80μg·mL-1。JNK信号通路特异性抑制剂SP联合重楼皂苷Ⅰ处理乳腺癌细胞,用膜联蛋白V-碘化丙锭(Annexin V-PI)双染法检测不同处理方式下的细胞凋亡率,蛋白印迹(Western blot,WB)检测不同处理方式下细胞凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved-caspase 3,cle.cap.3)、B淋巴细胞瘤相关的2蛋白(B lymphocytoma-2-associated X protein,Bax),自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅰ(Microtubule-associated protein light chain 3Ⅰ,LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、自噬相关基因(Beclin),Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路相关蛋白磷酸化JNK(phosphorylation JNK,p-JNK)、JNK。结果 从20、50、80、110、140μg·mL-1重楼皂苷中筛选最适浓度80μg·mL-1。与阴性对照组相比,实验组乳腺癌细胞的凋亡率明显升高(P0.05),cle.cap.3、Bax、LC3Ⅱ、Beclin、蛋白表达均显著上调(P0.05),p-JNK、LC3Ⅰ蛋白表达显著下调(P0.05)。与实验+DMSO组相比,实验+SP组癌细胞的抑制率和凋亡率均显著降低(P0.05),cle.cap.3、Bax、LC3Ⅱ、Beclin、下调(P0.05),p-JNK、LC3Ⅰ上调(P0.05)。结论 重楼皂苷Ⅰ促进乳腺癌细胞发生凋亡和自噬,JNK信号通路的活性参与药物的调控作用,为重楼皂苷Ⅰ在乳腺癌治疗中的应用提供支持。

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