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间充质干细胞深低温保藏技术体系的建立与初步分析

朱志浩  高家明  沈君颜  祝建波  刘海亮  
【摘要】:采用不同的冻存剂冻存脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSC),冻存复苏后检测细胞活性、细胞周期、成骨分化变化和基因表达谱变化,明确冻存剂的冻存效果。本实验采用三种冻存剂,六组实验; 1号,5%DMSO+10%FBS; 2号,5%DMSO; 3号,5%Trehalose+10%FBS; 4号,5%Trehalose; 5号,5%L-carnitine+10%FBS; 6号,5%L-carnitine;分别冻存ADSC,复苏后通过CCK-8,检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期,以及成骨诱导分化,并对5%DMSO+10%FBS为冻存剂,冻存前后进行基因表达谱分析。细胞活性检测分析。1号与2号相比,冻存效果差异显著,3号与5号相比,冻存效果相似,总体来看,1号,2号冻存效果要比3号,5号要好。2号不如1号冻存剂效果好。使用4号和6号冻存剂,细胞冻存后基本不能存活。并且使用5%DMSO+10%FBS为冻存剂,分别对冻存前和冻存后的ADSC进行了表达谱分析,结果表明,在冻存过程中,DMSO的存在会对细胞的表达谱会产生一定的影响。

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