褪黑素治疗对创伤性脑损伤大鼠海马组织炎症反应的影响

【摘要】：目的观察褪黑素(MEL)治疗对创伤性脑损伤(TBI)大鼠认知功能及海马组织Toll样受体4(TLR4)介导的炎性因子表达水平的影响。方法选择72只雄性SD大鼠,鼠龄3～4个月,体质量约230～280 g。按随机数字表法分为假手术组(SHAM组)、TBI组、MEL治疗组(MEL组),每组24只。采用Feency重物自由落体撞击法建立TBI模型;SHAM组大鼠开骨窗后不用撞针撞击,骨蜡封闭骨窗后直接缝合皮肤;MEL组大鼠在TBI建模后每天进行MEL(10 mg/kg)腹腔注射,每天1次,共计14次。在建模1周后,利用Morris水迷宫测试系统评估大鼠认知功能;Western blot法检测大鼠海马组织中Toll样受体4(TLR4)蛋白、核因子κB(NF-κB)P65蛋白的表达水平;酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测大鼠海马组织中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6等炎性因子的表达水平。结果 Morris水迷宫检测发现,在第1天至第5天的定位航行实验中,TBI组、MEL组大鼠逃逸潜伏期较SHAM组延长(P 0.05);与TBI组比较,MEL组大鼠逃逸潜伏期缩短(P 0.05)。第6天空间探索实验发现,TBI组、MEL组大鼠穿越平台次数较SHAM组减少(P 0.05);MEL组大鼠穿越平台次数较TBI组增加(P 0.05)。Western blot检测结果发现,TBI组、MEL组大鼠海马组织中TLR4蛋白相对表达水平分别为(3.31±0.06)、(1.98±0.05),NF-κB P65蛋白相对表达水平分别为(2.96±0.07)、(2.01±0.06),均较SHAM组升高(P 0.05);MEL组大鼠海马组织中TLR4蛋白、NF-κB P65蛋白表达水平较TBI组下降(P 0.05)。ELISA检测结果发现,TBI组、MEL组大鼠海马组织中IL-1β表达水平分别为(87.65±7.26) pg/mL、(69.36±5.27) pg/mL,TNF-α表达水平分别为(56.21±3.84) pg/mL、(37.56±3.47) pg/mL,IL-6表达水平分别为(146.61±11.31) pg/mL、(97.25±12.79) pg/mL,均较SHAM组升高(P 0.05);MEL组大鼠海马组织中IL-1β、TNF-α、IL-6表达水平较TBI组下降(P 0.05)。结论大鼠在TBI后出现不同程度的认知功能障碍;MEL能够改善TBI后认知功能损伤,其机制可能是通过减轻海马组织中TLR4介导的炎症损伤发挥神经保护作用。