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沉默LncRNA H19通过调节神经生长因子抑制心肌梗死后交感神经重构

张学丽  郑璐  王瑜  王康  闫素华  
【摘要】:目的探讨H19与神经生长因子(NGF)在心肌梗死(MI)后室性快速性心律失常(VAs)发生过程中的作用与调控关系。方法采用左冠状动脉结扎法建立大鼠MI模型。(1)将14只健康SD大鼠分为MI组和假手术组(sham组),每组7只,采用qRT-PCR法检测MI后7d长链非编码RNA H19(LncRNA H19)的表达;(2)将32只大鼠随机分为假手术+对照病毒组(sham+NC组)、假手术+沉默病毒组(sham+siH19组)、MI+对照病毒组(MI+NC组)、MI+沉默病毒组(MI+siH19组),每组8只,在MI手术当天,将H19沉默慢病毒或对照病毒注射到左心室心肌,在MI后7 d处死之前,进行电生理检查,取出心脏,分别采用Western blotting、qRT-PCR和免疫荧光等方法检测H19的表达及其对NGF、神经重构指标酪氨酸羟化酶(TH)、生长相关蛋白43(GAP43)及心律失常易感性的影响;(3)将24只大鼠随机分为MI+NC组、MI+siH19组和MI+siH19+LV-NGF组,每组8只,进行回复实验,采用Western blotting、免疫荧光法检测NGF、TH和GAP43的表达。结果大鼠MI 7 d后,H19表达上调(P0.01);沉默H19后,免疫荧光结果显示,大鼠MI后TH、GAP43的阳染面积下降(P0.001);程序性电刺激显示,MI后VAs的易感性降低(P0.001);沉默H19可以有效抑制NGF的表达(Z=-2.402 P=0.016),而且沉默H19对交感神经重构的抑制作用也可被过表达的NGF改善(P_(TH)0.001,P_(GAP43)=0.001)。结论 MI后沉默H19可通过调节NGF的表达而抑制交感神经重构,从而降低MI后心律失常的发生率。

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