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七筋菇植物ISSR-PCR反应体系研究

王祎玲  廖海民  赵桂仿  
【摘要】:为建立适宜于七筋菇C lintonia udensisTrautv.etM ey.ISSR-PCR分析的扩增体系,确定引物适宜的退火温度,利用正交试验设计,从Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶单位、引物浓度4种因素4个水平,对七筋菇ISSR-PCR反应体系进行优化。结果表明,根据Tm-5℃±5℃设定引物的退火温度梯度,确定出不同引物的最适退火温度。对引物873来说,其最适退火温度为53℃。按照正交试验设计,测试不同引物各因子之间在不同水平的组合情况,确定不同引物的最佳组合体系。引物897在第10组合反应最佳即3.0 mmol.L-1Mg2+;0.2mmol.L-1dNTP;0.1

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