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红树植物秋茄叶片双向电泳技术体系的建立及优化

于冯  郑春芳  施孟如  刘伟成  仇建标  冀德伟  黄丽  陈少波  
【摘要】:对适用于秋茄(Kandelia candel)叶片蛋白质组学研究的双向电泳技术体系进行了优化。结果表明,采用酚抽提法提取的蛋白质浓度较低,约1.7μgμL-1,SDS-PAGE电泳后几乎无条带;而采用改良TCA-丙酮沉淀法可显著提高提取液中蛋白质的含量,可达12.4μgμL-1。秋茄叶片蛋白质主要分布在pH 4~7的范围内,最适于采用pH 3~10 NL的胶条,17 cm胶条的最适上样量为400μg,经银染后可得蛋白点约(564±34)个。用TCA-丙酮沉淀法提取秋茄叶片全蛋白质组,按优化的参数进行双向电泳分离,获得了高分辨率、高重复性的图谱,可用于秋茄蛋白质组学研究。

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