酿酒酵母在高糖胁迫条件下蛋白酶A的分泌特性

【摘要】：现代发酵工业通常用高浓度糖作为培养物,然而由于蛋白酶A分泌过度,导致啤酒酿造过程中泡沫稳定性下降。为了更好地理解在高糖胁迫条件下酿酒酵母蛋白酶A分泌的特性,使用含高浓度葡萄糖的YNB培养基培养酵母,从培养基上分离出的蛋白酶A酶原(Pro-PrA)通过凝胶排阻色谱纯化,并使用荧光底物分析技术检测蛋白酶A(PrA)的活力。经过SDS-PAGE分离得出纯化的PrA和Pro-PrA的相对分子质量分别为42 kDa和54 kDa。这表明,在高浓度葡萄糖培养的条件下的PrA的代谢方式与正常条件下完全不同,而葡萄糖浓度可能对其分泌过程有很大的影响。进一步的研究表明,在高浓度葡萄糖条件下,PrA在细胞培养的对数生长期释放出来,且产量要比正常培养条件下高出11倍。在酸性条件下,PrA由自身激活。本研究证实了被称作pseudo-PrA的逐步自激活途径对于细胞外的PrA酶原的自激活过程发挥了主要作用。