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利用多重PCR反应同时筛选番茄Tm2~2和Mi基因

李君明  宋燕  陈丽静  杨宇红  徐和金  冯兰香  张智  周永健  
【摘要】:利用同一PCR反应体系,分别对番茄(Lycopersiconesculentum)抗根结线虫(root-knotnematode)的Mi基因、抗番茄花叶病毒(Tomatomosaicvirus)病的Tm22基因紧密连锁的SCAR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段基本完全吻合。与Mi基因紧密连锁的SCAR1标记为共显性标记,抗感材料均产生750bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqⅠ酶切位点,酶切后分别产生了570和200bp以及750、570和200bp的特异性片段,而感病基因型无酶切位点;与Tm22基因紧密连锁的SCAR2标记也为共显性标记,抗感材料均产生950bp的特异片段,杂合抗病基因型和感病基因型有HindⅢ酶切位点,酶切后除Moperou产生800bp特异片断外,其余杂合抗病材料均为950、500和280bp片段。感病材料为500和280bp,纯合抗病基因型无HindⅢ酶切位点,酶切结果仍为950bp产物。该体系可用于在同一PCR反应体系中对2个抗病基因进行同时筛选鉴定,及苗期早期辅助选育。

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