柿和君迁子SSR分析技术的建立
【摘要】：通过搜寻核酸数据库中柿属植物核苷酸序列,利用Sputnik程序查找微卫星,利用Primer Premier 5.0软件设计特异微卫星引物,并对影响PCR扩增的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物浓度, 以及退火温度等因素进行优化。最终确定柿(Diospyroskaki )和君迁子(D.lotus) SSR-PCR最佳反应体系为:模板DNA30 ng,Buffer 1×,Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq DNA酶1 U,引物0.3 μmol/L,反应总体积20 μL,退火温度50 ℃。
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