甜橙β-胡萝卜素羟化酶cDNA克隆及其瞬间反义表达

【摘要】：根据已报道的温州蜜柑(Citrusunshiu)β-胡萝卜素羟化酶(BCH)cDNA 序列(AF296158),设计1对引物,以华盛顿脐橙(C.sinensis)成熟果实 cDNA 为模板,采用 PCR 扩增出1条长为1057 bp 的 cDNA 片段,将此片段克隆入 pUCm-T 载体,测序结果表明,所得序列与已报道序列同源99.62%,表明所获得的基因是 BCH 基因。将该基因反义插入到 pBI121中构建成反义植物表达载体,其正确性得到测序的鉴定。含有该植物表达载体的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)在脐橙白皮层中诱导了β-胡萝卜素积累。

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