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番茄乙烯信号转导相关基因EIN3(Le-EIL)的克隆和表达

徐晶宇  罗云波  魏绍冲  
【摘要】:根据拟南芥(Arabidopsisthaliana)、烟草(Nicotianatabacum)EIN3基因保守区序列设计简并引物,采用RT-PCR扩增从番茄(Lycopersiconesculentum )果实中得到一个486bp的同源片段。以此片段作为探针,从番茄果实cDNA文库中分离到一个拟南芥EIN3的同源基因的cDNA克隆,命名为Le-EIL。该克隆含有一个1845bp的开放阅读框,编码615个氨基酸。经同源分析,它与烟草TEIL基因的同源性为79%,与拟南芥EIN3、EIL1、EIL2和EIL3的同源性分别为59%、56%、52%、46%。Le-EIL基因表达与番茄果实的成熟及乙烯生成情况具有较强的相关性。在普通番茄果实的不同成熟时期Le-EIL基因都有表达,并且随着成熟度的增加基因表达有明显的增强,在转色期和粉红期Le-EIL基因的表达最强,在全红期后减弱。在转反义ACS基因的转基因番茄果实中,只有开花后60 d的果实中Le-EIL基因有微弱的表达,在其它成熟时期均没有表达。

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