HepG2细胞蛋白质组双向电泳条件的优化与图谱的建立

【摘要】：目的:优化双向电泳的样品处理方法,建立HepG2细胞蛋白质双向电泳图谱。方法:用含10%胎牛血清的RPM11640培养液培养HepG2细胞,胰酶消化后收集细胞,加入细胞裂解液使细胞充分裂解,冰浴超声离心后取上清液进行双向凝胶电泳,电泳图谱经考马斯亮蓝染色及图像扫描与分析。结果:通过对HepG2细胞蛋白提取液进行双向电泳,在13 cm pH 3~10(L)IPG胶条上可分离到(297±23)个重复性及分辨率均较好的蛋白质点,蛋白斑点的匹配率为83%。结论:HepG2细胞蛋白质组双向电泳条件的优化及图谱的建立,为进一步研究肝癌蛋白质组学奠定了基础。