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哈维氏弧菌感染的杂色鲍全组织均一化cDNA文库的构建

姜敬哲  张微  王江勇  王瑞旋  刘广锋  
【摘要】:提取了哈维氏弧菌(Vibrio harveryi)感染的杂色鲍(Haliotis diversicolorReeve)总RNA,采用SMART方法合成双链cDNA,并用双链特异核酸酶进行均一化处理。割取0.5~1.0和1.0~3.0kb的片段分别连接pDNR-LIB并转化大肠杆菌(Esherichia coli),最终构建2种片段大小的杂色鲍全组织均一化cDNA文库。2文库库容均在2.5×105cfu.mL-1左右,PCR检测阳性重组率为100%。随机挑取200个克隆测序,获得高质量EST序列174条。组装后得到149条Unigenes,冗余率为14.37%。序列注释结果表明,有39条Unigene序列与已知基因高度相似。综上所述,文章所建cDNA文库质量良好,可以满足后续研究工作的需要。

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