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豌豆中抗寒相关性miRNAs功能特异性验证及其克隆的研究

王莹  龙亮华  
【摘要】:以正常(对照)和寒冷诱导豌豆(Pisumsativum Linn)幼苗为研究对象,用已知模式植物拟南芥中抗寒性相关的4种miRNAs序列(miR319、miR393、miR397、miR402)设计引物,通过半定量PCR法,检测在豌豆中正常条件和寒冷诱导下可能出现的相关miRNAs.在此基础上,选取模式植物中已知的miR319序列,设计特异引物,寻找豌豆抗寒性相关的miRNAs.结果表明:miR319、miR393、miR397、miR402均存在于豌豆中,并且冷处理诱导下表达量都有所上升,此结果验证了抗寒性miR家族在植物间存在保守性的特点;特异性寻找克隆、测序结果表明,新的与抗寒性相关的miRNAs也存在于豌豆中.本研究建立的寻找或验证miRNAs的方法是可行的,并为在各种生物中miRNAs功能研究与应用打下良好基础.

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