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里氏木霉β-木糖苷酶的分离纯化、酶学性质及水解机理研究

江小华  朱均均  余世袁  勇强  
【摘要】:通过硫酸铵沉淀、超滤脱盐、离子交换层析、凝胶过滤层析等手段,从里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30木聚糖酶粗酶液中分离纯化得到分子质量110.8 ku、比活力为61.99 IU/mg的电泳纯β-木糖苷酶。酶学性质研究结果表明:该酶反应以温度60℃、pH值3.5为宜,在60℃以下、pH值3.0~8.0酶活性稳定,且该酶作用于对硝基苯基-β-D-木糖苷的Km值和Vmax值分别为0.29μmol/mL和169.99 IU/mg。酶水解机理研究结果表明,该酶从低聚木糖的非还原性末端切断β-1,4-糖苷键释放出木糖,其最适作用底物是短链的低聚木糖,随着低聚木糖碳链的增长,酶作用效率逐渐下降,而对木聚糖几乎不降解。

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