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人羊膜间充质干细胞旁分泌对成骨细胞的影响

王贵玲  洪滔  淦岷  仇丽鸿  
【摘要】:目的探究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)旁分泌对人成骨细胞生物活性的影响。方法酶消化法提取原代hAMSCs,并检测细胞表面标记物表达。收取hAMSCs 24 h培养上清与新鲜培养液1∶1配比作为条件培养基(condition medium,hAMSC-CM),以新鲜培养液作为阴性对照,作用于人成骨样细胞系MG63,观察对细胞生物活性的影响。MTT法检测连续1~4 d细胞增殖情况;Transwell小室测定细胞2.5 h迁移情况,苏木素-伊红染色后拍照计数;对硝基苯磷酸二钠(pNPP)法检测培养5 d后细胞内ALP表达。结果 hAMSCs呈典型的成纤维样细胞形态,细胞表面阳性表达CD29、CD105、CD49d、CD44;阴性表达CD34、CD45、CD31和HLADR。hAMSC-CM在第1~3天均可显著促进MG63增殖(P0.05);hAMSC-CM显著增强MG63迁移能力(P0.05);hAMSC-CM培养组细胞中ALP表达显著强于对照组(P0.05)。结论 hAMSCs可通过CM介导的旁分泌作用增强成骨细胞生物活性。

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