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蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体的制备及其应用方法的建立

董胜张  高秀云  程正贤  胡萃  叶恭银  
【摘要】:为深入研究寄生蜂卵黄发生及其内分泌调控,特采用杂交瘤细胞技术,制备4株能稳定分泌抗蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum卵黄蛋白(vitellin,Vt)的单克隆抗体(mAb),即PpVt mAb1,PpVt mAb2,PpVt mAb3和PpVt mAb4。这4株单克隆抗体的重链和轻链的亚类均分别为IgG1和κ类型,不仅特异性识别Vt,而且识别雌蜂血淋巴中卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg),但与雄蜂体液无反应。通过比较4种不同的ELISA方法,确定了微量检测蝶蛹金小蜂体内Vg/Vt的最适ELISA法,即双夹心ELISA法。该方法可用于单头雌蜂体内Vg/Vt的检测,其检测灵敏

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