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人总MBP干扰RNA真核表达载体的构建及MBP功能初步研究

兰海霞  呼格吉乐  王艳艳  高乃康  
【摘要】:目的本研究构建4个携带髓鞘碱性蛋白(MBP)公共序列的干扰RNA真核表达载体,并转染人神经胶质细胞U251细胞,为研究MBP在新生儿脑损伤中的作用提供平台。方法 (1)构建4个携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体,酶切后将酶切片段测序鉴定;(2)利用脂质体转染将构建的MBP干扰RNA真核表达载体转入U251细胞株内。结果 (1)成功构建了4个携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体;(2)在U251细胞中有绿色荧光蛋白表达,经反转录-聚合酶链反应检测MBP干扰成功;(3)干扰U251细胞中MBP表达后,致使U251细胞生长变慢。结论成功构建携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体,利用载体干扰MBP基因,结果表明MBP在U251细胞生长过程中起重要作用。

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