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东部马脑炎病毒E2基因的克隆与表达

何竞  常国辉  吴劲松  李钟铎  祝庆余  
【摘要】:目的 :克隆表达东部马脑炎病毒 (easternequineencephalomyelitisvirus ,EEEV)E2基因 ,研究重组蛋白的抗原性 ,为研制东部马脑炎病毒基因工程诊断试剂奠定基础。方法 :由病毒感染的鼠脑制备总RNA ,利用RT_PCR技术扩增EEEVE2基因全长序列 ,并将其克隆至pGEM_Teasy载体测序 ,再将E2基因克隆至谷胱甘肽转移酶 (GST)融合表达载体pGEX_5x_2中表达。采用免疫印迹试验 (Westernblotting)和ELISA法分析表达的重组蛋白的抗原性。结果 :经过RT_PCR扩增和测序 ,证明得到的E2基因片段的序列是正确的 ,并且在原核

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3 尉继征;林磊;熊伟;李佳明;杨保安;祝庆余;;东部马脑炎病毒E2基因与GM-CSF共表达质粒的构建及其免疫原性初步研究[J];军事医学科学院院刊;2007年01期
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