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重金属铬单克隆抗体特异性ELISA免疫检测方法的建立

俞华齐  王娟  姜忍忍  姚刚  刘少伟  
【摘要】:为了利用抗体库筛选技术制备检测重金属铬的单克隆抗体,本研究利用螯合剂DTPA成功制备了重金属Cr的完全抗原,并利用制备的完全抗原结合噬菌体展示技术成功筛选到了特异性识别Cr-DTPA的噬菌体抗体Cr-DTPA-VHH 4-63。结果显示,获得的抗体亲和常数为1.279×10~9L/mol,与载体蛋白BSA/OVA及无金属抗原DTPA-BSA/OVA均无交叉反应,与其他金属离子也没有交叉反应,特异性强。利用制备的Cr-DTPA噬菌体抗体初步建立了ELISA免疫检测法,其方法最低检测限达到1μg/L,水样加标回收试验平均回收率90%~114%,达到国家饮用水检测标准,可用于农业灌溉用水及生活饮用水中的重金属铬的检测。

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