收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Ca_v1.2钙通道GST-CT1蛋白片段与胞浆钙调蛋白提取纯化的比较

晏珊  封瑞  杨磊  孙宇  王千慧  郭凤  赵美眯  孙雪菲  郝丽英  
【摘要】:目的对比分析心肌Ca_V1.2钙通道片段GST-CT1融合蛋白与胞浆钙调蛋白(calmodulin,CaM)提取与纯化方法的异同。方法将pGEX-6p-3/CT1和pGEX-6p-3/CaM重组质粒转入E.coli BL21菌株,筛选得到转化成功的菌株并用IPTG诱导其表达,GS-4B beads分离纯化,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定目的蛋白及其相对纯度,Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白和CaM蛋白的生物学活性。结果采用超声破碎法,应用N-laurylsarcosine和Triton X-100处理后提取的GST-CT1融合蛋白浓度和纯度显著高于未用两者处理的对照组,而N-laurylsarcosine和Triton X-100对胞浆蛋白CaM的提取和纯化无明显影响。结论细胞膜通道蛋白GST-CT1的提取和纯化方法与胞浆蛋白Ca M存在明显差别。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 梁润梅,董惠文;钙通道[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1994年05期
2 黄欣,李宏建,周聊生;T型钙通道介导的体内生物活性进展[J];山东医药;2001年05期
3 金松南;文今福;金景玉;曹景宇;;T型钙通道对心脏功能的调节作用[J];生命的化学;2008年06期
4 高尚邦;李臣鸿;;钙释放激活钙通道研究进展[J];现代生物医学进展;2009年02期
5 Harald Reuter ,李文伦;钙通道的多样性和复杂性[J];世界科学;1990年02期
6 ;平滑肌钙通道调节[J];中华心血管病杂志;1996年06期
7 甘戈,梅其炳,赵德化;P型钙通道研究进展[J];生理科学进展;1997年01期
8 桂培春;平滑肌胞内钙对L型钙通道的调控[J];高血压杂志;1998年01期
9 郑素玲;人体内钙通道的分类及功能[J];华北煤炭医学院学报;1999年01期
10 刘亮,张宗明;钙库调控性钙通道分子结构的研究进展[J];上海医学;2005年05期
11 李沪生,刘远谋;心脏中的T型钙通道[J];上海第二医科大学学报;2005年02期
12 徐家驹;;钙通道和钙拮抗剂[J];生命的化学(中国生物化学会通讯);1991年03期
13 时飒;金连弘;申景岭;孙轶华;郭筠秋;李冬梅;;大鼠骨髓间充质干细胞L-型钙通道的表达及电流检测[J];解剖学报;2007年01期
14 范力群;;受体调节钙通道有三种机制[J];生理科学进展;1988年01期
15 刘海军;孙晋民;刘翀;郝丽英;;脑线粒体膜钙通道检测方法的实验研究[J];山东医药;2009年31期
16 杜正清;弓娜;覃春丽;;二氧化硫衍生物对大鼠背根神经元钙通道不同亚型的影响[J];生物物理学报;2009年S1期
17 蓝庭剑;;电压激活钠、钙通道的分子结构与机能[J];四川生理科学杂志;1992年04期
18 祝世功,计国义,曹晓杰,潘玉贞,王绍;氯化镧对下丘脑神经元L型钙通道的影响[J];中国病理生理杂志;1999年11期
19 高旭辉,王武军;淋巴细胞钙通道及细胞内钙离子的研究进展[J];医学综述;2004年11期
20 何加强,郑永芳;平滑肌钙通道的研究进展Ⅳ.平滑肌钙通道研究中的膜片钳技术问题[J];中华心血管病杂志;1997年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杜正清;弓娜;覃春丽;;二氧化硫衍生物对大鼠背根神经元钙通道不同亚型的影响[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年
2 赵美眯;郝丽英;;钙调蛋白激酶在L型钙通道“run-down”现象发生及恢复过程中的作用[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
3 郝丽英;;细胞内因子介导的钙通道调节新机制[A];中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议论文集[C];2007年
4 郝丽英;;钙调蛋白在钙通道钙依赖性易化与失活机制中的作用[A];全国第十一届生化与分子药理学学术会议论文集[C];2009年
5 王世强;E.G.Lakatta;程和平;;细胞膜单个L型钙通道与ryanodine受体间的钙信号转导[A];第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集[C];2002年
6 祝捷;罗和生;夏虹;;L-型钙通道α1亚单位的表达及其电流变化在腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠中的研究[A];第九次全国消化系统疾病学术会议专题报告论文集[C];2009年
7 开丽;王中峰;施玉樑;胡德耀;刘良明;;阿片受体拮抗剂通过调控血管平滑肌钙通道增加休克大鼠动脉血压[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年
8 梁华敏;唐明;刘长金;骆红艳;宋元龙;胡新武;席姣娅;高琳琳;聂斌;李素兰;赖玲玲;Juergen HESCHELER;;不同发育阶段M-胆碱能受体对小白鼠胚胎心肌细胞L型钙通道的调节[A];中南地区第六届生理学学术会议论文摘要汇编[C];2004年
9 于德洁;鲍光宏;林琳;郑永芳;;非选择性阳离子通道和L型钙通道是ECV304内皮细胞Ca~(2+)内流的途径[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年
10 廖艳萍;汤长发;;钙通道以及不同运动对线粒体钙转运的影响[A];湖南省生理科学会2008年度学术年会论文摘要汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 张洁;钙离子通道与心脏病[N];医药经济报;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978