长链非编码RNA MTHFD2基因在胶质母细胞瘤的表达及生物学功能

【摘要】：目的长链非编码RNA(lncRNA) MTHFD2基因在胶质母细胞瘤(GBM)组织与正常脑组织中的表达有明显差异,但其在肿瘤尤其是GBM的生物学功能目前尚不清楚。文中旨在研究lncRNA MTHFD2在人GBM组织和细胞系中的表达情况,并观察下调其表达对GBM细胞生物学功能的影响。方法选取2017年9月至2017年12月东部战区总医院神经外科经手术切除的9例GBM患者标本,同时取其配对的瘤旁组织作为正常对照组织。取对数生长期的U251和U-87MG细胞,接种细胞24 h后分别加入LV-MTHFD2-shRNA病毒液(U251shRNA组、U-87MGshRNA组)和空载LV-control病毒液(U251对照组、U-87MG对照组)。采用qRT-PCR检测GBM组织和细胞系中lncRNA MTHFD2的表达。CCK-8检测细胞增殖和对化疗药物替莫唑铵的耐药情况。Transwell小室评价细胞迁移能力的变化等。结果 GBM组织lncRNA MTHFD2相对表达量明显高于正常对照组织[(5.13±3.96)vs(1.27±0.58)],差异有统计学差异(P0.05)。与U251对照组MTHFD2的相对表达量(1.02±0.08)比较,U251shRNA组(0.05±0.01)明显降低(P0.01);U-87MGshRNA组较U-87MG对照组亦明显降低(P0.05)。U251shRNA组穿过Transwell微孔滤膜的细胞数量与U251对照组比较明显降低[(41.4±6.99)个/视野vs (125.8±25.27)个/视野],差异有统计学意义(P0.01);U-87MGshRNA组较U-87MG对照组亦明显降低(P0.05)。CCK-8结果显示,在第4天,U251shRNA组A值较U251对照组明显降低,U-87MGshRNA组A值较U-87MG对照组亦明显降低(P0.05)。细胞耐药性结果显示:U251shRNA组细胞抑制率明显高于U251对照组,U87-MGhRNA组亦明显低于U87-MG对照组(P0.05)。结论 lncRNA MTHFD2在GBM细胞中的表达下调可降低细胞的增殖和迁移能力,增强对化疗药物替莫唑铵的敏感性,提示其可能为GBM潜在的治疗靶标。