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鸡p15~(INK4B)蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

艾永兴  郝军元  肖昌  邹亚学  郑梅竹  张玉静  
【摘要】:用制备并纯化的鸡p15INK4B蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了p15INK4B蛋白的单克隆抗体,并进行了鉴定。结果表明:2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C6和3F5分别属于IgG1和IgM抗体亚类;培养上清的效价分别为1∶820和1∶680,腹水的效价分别为1∶4×106和1∶7×105;2株单克隆抗体亲和力常数分别为3.13×109L/mol(1C6)和1.24×108L/mol(3F5),相对亲和力1C63F5,且具有不同的抗原识别位点;Western-blot鉴定表明,1C6和3F5这2株单克隆抗体均能与原核表达纯化的和杆状病毒表达的p15INK4B蛋白结合,而不与其他蛋白结合,说明本研究成功制备了鸡p15INK4B的单克隆抗体,可作为深入研究鸡p15INK4B蛋白的功能提供特异的抗体材料。

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