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用T7噬菌体展示系统筛选与晚期糖基化终产物受体胞内段相结合的蛋白

赵善超  李志杰  刘靖华  邓鹏  秦清和  黄浩  刘亚伟  侯凡凡  姜勇  
【摘要】:目的 用T7噬菌体筛选系统筛选在细胞内与晚期糖基化终产物受体 (RAGE)结合的蛋白。方法 以重组RAGE为靶蛋白 ,用谷胱甘肽亲和树脂为介质 ,筛选T7人肺cDNA文库。结果 筛选 6轮后选择 6 4个噬菌体单个噬斑克隆 ,经EDTA处理后利用特异性PCR引物扩增插入片段 ,回收PCR产物并进行测序 ,将所得到的序列用BLAST软件搜索GenBank中的同源序列 ,得到了 2 5个编码蛋白的序列。结论 T7噬菌体展示筛选系统是筛选新的结合蛋白的一种简单、快速和有效的手段 ,所筛选的与RAGE胞内段相互作用的蛋白对进一步研究其信号转导通路的复杂功能和调节机制提供了很好的靶点。

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