收藏本站
收藏 | 投稿 | 论文排版

橘色双冠丽鱼黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定

宋红梅  周康奇  田雪  汪学杰  刘超  刘奕  牟希东  胡隐昌  
【摘要】:为探讨橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定方法,观察鱼类色素细胞生长特征,本研究以橘色双冠丽鱼的尾鳍、鳞片、皮肤组织为材料,在25℃~28℃条件下,分别在胰蛋白酶溶液和胶原酶溶液中消化6 h和12 h,可有效分离出色素细胞团,细胞悬液经气孔尼龙网过滤后,于35%-45%-55% Percoll试剂中梯度分离和收集黄色素细胞和黑色素细胞。采用K-SFM培养基进行细胞原代培养和细胞纯化,抑制成纤维细胞和角朊细胞的生长,用十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)、双抗、bFGF的DMEM培养基进行色素细胞传代培养;运用巴染色和透射电镜观察细胞形态,并用分子标记技术进行细胞鉴定。结果显示,细胞分离时,黑色素细胞位于Percoll试剂45%和35%浓度层之间,黄色素细胞位于Percoll试剂35%浓度层上,2种色素细胞均凝聚成絮状。透射电子显微镜观察发现,黑色素细胞内部含大量黑色素小体,而黄色素细胞内部含喋呤体和类胡萝卜素囊泡;黑色素细胞左旋多巴(L-DOPA)染色呈阳性;取第10代色素细胞进行体色相关基因黑皮素1受体(melanocortin receptor 1,MC1R)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)和牛内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB) PCR检测,显示基因扩增条带特异性强,表明获得的2种色素细胞具有良好的生物学活性。本研究建立了橘色双冠丽鱼黄色素细胞和黑色素细胞的分离培养与鉴定方法,为进一步开展鱼类体色细胞分化和体色形成的分子机理研究提供了细胞模型。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前14条
1 胡菊;冯彩;马晓;吴利敏;刘慧芬;宋红梅;胡隐昌;田雪;李学军;;锦鲤墨蝶呤还原酶基因的克隆、表达和定位分析[J];水产学报;2020年04期
2 易云海;宋一舸;杨舟;文胜;刘锦辉;肖亚梅;;鱼鳍和鳞片色素组成的比较观察[J];激光生物学报;2014年01期
3 王鑫,郭恩棉,苏振渝,张丽,付国庆;鱼类白化现象病因浅析[J];海洋科学;2003年07期
4 刘晓东;陈再忠;;七彩神仙鱼皮肤色素细胞观察及类胡萝卜素组分分析[J];上海水产大学学报;2008年03期
5 王良炎;顾靓;庞小磊;郭生强;黄俊翔;姚徐明;田雪;;不同体色锦鲤(Cyprinus carpio)鳞片色素细胞的观察[J];河南水产;2016年01期
6 韦敏侠;宋红梅;祁宝伦;刘超;罗建仁;胡隐昌;;橘色双冠丽鱼胚后色素细胞发育与体色变化[J];上海海洋大学学报;2015年01期
7 李俊;潘孝毅;易新文;张含乐;张文兵;麦康森;;鱼类体色形成及其营养调控的研究进展[J];饲料工业;2016年10期
8 严俊丽;陈四清;常青;刘长琳;胡建成;王志军;;圆斑星鲽仔稚鱼色素细胞发育和体色变化[J];水产学报;2017年05期
9 张希;杨宁;孙鶱;黄海;;不同颜色品系暹罗斗鱼色素细胞的观察[J];水产科技情报;2014年06期
10 杨永铨,刘爱知,夏德全;鲤鱼性状遗传及其在杂交育种上的应用[J];淡水渔业;1980年03期
11 周康奇;潘贤辉;牟春艳;郑曙明;;血鹦鹉鱼鳞片及色素细胞的显微和超微结构研究[J];淡水渔业;2020年05期
12 廖永冠;李育媚;鲍宝龙;;opn1lw2基因在红光诱导斑马鱼皮肤色素细胞形成中的作用[J];动物学杂志;2021年04期
13 张雨;李迪;;金鱼体色及其增色饲料研究综述[J];江西饲料;2009年04期
14 沈志刚;;养殖鱼类体色改良研究进展[J];齐鲁渔业;2009年10期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 刘伟;赵金良;魏磊;钱叶周;吴超;钱德;;鳜早期色素发育和色彩图案的形成[A];2018年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2018年
2 韩建;陈仕玺;洪万树;;大黄鱼“黄金肽”的研发与初步应用[A];2018年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2018年
3 蒋燕玲;宋红梅;刘奕;韦敏侠;汪学杰;胡隐昌;罗建仁;;橘色双冠丽鱼酪氨酸酶基因的克隆及其时序和组织表达特征[A];2015年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2015年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 韩建;大黄鱼体色变化机制的初步研究[D];厦门大学;2019年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 黄睿宇;大菱鲆白花斑体色形成生理机制的初步研究[D];中国海洋大学;2015年
2 刘伟;鳜皮肤图案形成与Cx39.4、Cx41.8基因表达的初步研究[D];上海海洋大学;2020年
3 牟春艳;虾青素对血鹦鹉鱼体色变化的研究[D];西南大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978