收藏本站
收藏 | 投稿 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大肠杆菌DNA复制相关蛋白PriC的初步研究

孔敏敏  李艳华  董宇辉  王文雅  袁其朋  
【摘要】:目的:对大肠杆菌DNA复制相关蛋白PriC进行研究。方法:构建重组表达载体pET21a-PriC及pET21a-PriC1-101,并进一步诱导表达纯化。利用Pulldown手段将pET21a-PriC-notag与pET28at-plus-PriB分别转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达及共纯化后检测PriC与PriB的相互作用情况。结果:PriC经Ni柱亲和层析纯化获得的蛋白稳定性较差,易沉淀。根据二级结构和蛋白稳定性预测及限制性蛋白酶水解结果,构建了PriC的截短突变蛋白PriC1-101,经Ni亲和层析和superdex75纯化,获得了稳定性较好的蛋白,经Western blot鉴定为目的蛋白。PriC1-101的圆二色谱分析发现其具有较多的α-helix和无规卷曲,这为更好的了解其结构奠定了重要的基础。通过Pulldown手段发现PriC与PriB存在相互作用,并且PriC的稳定性有所提高。结论:PriC蛋白的C-端氨基酸序列是PriC蛋白与PriB蛋白相互作用的主要区域,并对PriC蛋白的稳定性有较大影响。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 史军;;Hello,大肠杆菌[J];科学世界;2011年08期
2 ;赛默飞世尔科技助力欧洲新型大肠杆菌菌株研究[J];中国生物工程杂志;2011年07期
3 N.V.;;细菌,还是辐射?[J];新晋商;2011年08期
4 刘昊;闫循领;王文红;;银纳米线的制备及梳直[J];聊城大学学报(自然科学版);2011年01期
5 程相春;;DNA与几种表面活性剂的作用[J];化学工程师;2011年06期
6 杨微;;大肠杆菌耐药性的研究进展[J];畜牧与饲料科学;2011年06期
7 ;赛默飞世尔科技助力欧洲新型大肠杆菌菌株研究英国健康保护署使用LTQ Orbitrap质谱分析成效卓越[J];食品科技;2011年08期
8 陶国庆;李凤辰;邵菲;付水林;宫衡;;离子对色谱法测定细胞内α-酮戊二酸含量[J];化学与生物工程;2011年06期
9 杨希国;李欣南;李香珍;董娜;杨慧宁;;鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性研究[J];现代畜牧兽医;2011年07期
10 叶央芳;张利民;安艳捧;豪富华;唐惠儒;;大肠杆菌代谢物组成的核磁共振分析[J];分析化学;2011年08期
11 郑玉忠;张振霞;;分子生物学实验教学中DNA转化方法的简化[J];时代教育(教育教学);2011年07期
12 陈光;吴铭;王刚;孙旸;;重组人胶原蛋白肽在大肠杆菌中的高效表达[J];吉林大学学报(医学版);2011年04期
13 陈明;陈文静;;几种微生物表达系统的比较[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年03期
14 潘自皓;顾薇;潘扬;;流加培养方式对大肠杆菌XD-12发酵的影响研究[J];安徽农业科学;2011年24期
15 陈银;钱秀萍;何建勇;戈梅;殷瑜;;反义RNA靶序列对大肠杆菌ftsZ基因沉默效果的影响[J];沈阳药科大学学报;2011年07期
16 冉诗勇;王艳伟;杨光参;;DNA分子力学性质的测量[J];物理实验;2011年07期
17 费建明;吴岩;占鹏飞;施国方;王文兵;;利用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ[J];蚕桑通报;2011年02期
18 丁卫平;罗元明;艾国民;金城;;大肠杆菌44277(O2:K1)中rmlB基因功能[J];微生物学报;2011年09期
19 黄媛;陶颖;张文露;黄爱龙;胡接力;;一种新的DNA分子克隆方法[J];中国科学:生命科学;2011年09期
20 谢翎;陈红梅;尹翀;项小燕;黄勃;;大肠杆菌DH5α菌株感受态制备及转化率变化研究[J];生物学杂志;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘海英;陈刚;步宇翔;;碱基对的多铜修饰对DNA导电性的增强作用[A];中国化学会第28届学术年会第13分会场摘要集[C];2012年
2 邹丹丹;汪海林;;基于DNA甲基化结合蛋白MBD的甲基化分析[A];中国化学会第28届学术年会第2分会场摘要集[C];2012年
3 邢永政;刘冬生;;ATP诱导的DNA突环结构的打开及其对DNA链替换反应的调控[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
4 程巳雪;陈思;赵东;卓仁禧;;不同DNA复合物在基质介导基因传递中的性能[A];2011中国材料研讨会论文摘要集[C];2011年
5 邢永政;杨忠强;刘冬生;;一种配体结合调控的DNA链替换反应体系的构建[A];中国化学会第28届学术年会第3分会场摘要集[C];2012年
6 周晓萍;肖鹏;吕雪飞;邓玉林;;单链DNA的固定化技术研究[A];全国生物医药色谱学术交流会(2010景德镇)论文集[C];2010年
7 张泉;苏都莫日根;;线粒体DNA的数量调控与非孟德尔遗传[A];中国植物学会植物细胞生物学2010年学术年会论文摘要汇编[C];2010年
8 赵元彪;胥慧;何群;;粗糙脉孢菌DNA甲基化调控机制[A];中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会论文摘要集[C];2011年
9 赵文杰;汤超;王彩娟;刘军伟;卢奎;;β-胸苷与DNA相互作用[A];中国化学会第十二届全国应用化学年会论文集[C];2011年
10 邹传新;李洪林;;基于序列的蛋白质-DNA相互作用分析与机器学习预测[A];中国化学会第28届学术年会第14分会场摘要集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐铁刚;细菌DNA磷硫酰化修饰与限制[D];上海交通大学;2008年
2 高鹏;特异性介导DNA转导的多结构域嵌合蛋白的构建、表达及鉴定[D];吉林大学;2011年
3 郝刚;BuforinⅡ抗菌肽的分子设计及对DNA作用抑菌机理研究[D];江南大学;2009年
4 梅传忠;PI3K/Akt信号通路对DNA甲基转移酶3B基因表达的调控及其分子机制研究[D];复旦大学;2010年
5 崔鹏;适用于DNA电荷输运研究的紧束缚模型方法[D];山东大学;2010年
6 李敏;异翅亚目DNA条形码,谱系生物地理学及花蝽科(狭义)分子系统发育研究[D];南开大学;2010年
7 杨恩成;特异性多结构域DNA转导重组嵌合体在毕赤酵母中表达及其体内外转导作用[D];吉林大学;2010年
8 郭烁;DNA信号序列分析的基因预测方法研究[D];大连海事大学;2010年
9 张黎明;电磁辐射中低能电子诱导DNA直接损伤的理论研究[D];山东大学;2010年
10 吴初新;鱼类PKZ(Protein Kinase Containing Z-DNA Binding Domain)Zα与Z-DNA的结合[D];南昌大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 侯美灵;DNA微阵列数据分析及蛋白质相互作用网络研究[D];中国科学技术大学;2010年
2 乔柱;利用DNA长度编码实现分子计算[D];电子科技大学;2010年
3 李金京;单链DNA结合蛋白与单链DNA相互作用的AFM研究[D];吉林大学;2011年
4 李伟;DNA序列的图形表示方法研究[D];兰州大学;2010年
5 李秦豫;野生塔里木马鹿粪便DNA提取方法和性别鉴定研究[D];新疆大学;2010年
6 马英;DNA条形码技术在青海省小型兽类及寄生蚤鉴定中的应用研究[D];中国疾病预防控制中心;2010年
7 李全义;DNA荧光生物传感器的制备及水溶性量子点在DNA分析中的应用研究[D];青岛科技大学;2010年
8 刘刚;普氏野马粪便DNA方法优化及应用的可行性研究[D];北京林业大学;2011年
9 吴文化;几种鲟鱼及杂交种DNA条形码研究及分子鉴别[D];内蒙古农业大学;2010年
10 肖欣;缓步动物的DNA条形编码研究[D];陕西师范大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李荔;致命病菌很特殊[N];北京科技报;2011年
2 记者 李含;“DNA之父”詹姆斯·沃森做客清华论坛[N];新清华;2008年
3 李志晖 秦亚洲 曹国厂;我国大规模利用DNA技术“打拐”[N];中国改革报;2009年
4 本报驻特拉维夫记者 陈克勤;DNA伪造带来的震动[N];光明日报;2009年
5 本报记者 张巍巍;DNA样本也能作假[N];科技日报;2009年
6 记者 郑晓春;可区分真伪DNA的检测技术问世[N];科技日报;2009年
7 日报记者 曾繁华 闫友明 通讯员 刘晓颖;DNA:我的应用很广泛[N];柳州日报;2010年
8 记者 毛黎;科学家拍摄到人体DNA修复重要环节[N];科技日报;2009年
9 刘霞;科学家研发出新型人工合成DNA载体[N];科技日报;2010年
10 记者 班玮;德研究人员:人或是大肠杆菌原始宿主[N];新华每日电讯;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978