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miR-145-5p靶向调控MRGBP基因表达对晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响

胡超前  
【摘要】:目的探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)是否通过靶向调控MRG结构域结合蛋白(MRGBP)基因表达来影响晶状体上皮细胞增殖和凋亡。方法使用紫外线照射晶状体上皮细胞SRA01/04,构建细胞凋亡模型。在细胞中转染anti-miR-145-5p或pcDNA-MRGBP,并构建细胞凋亡模型。实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-145-5p、MRGBP mRNA在SRA01/04细胞中的表达,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测MRGBP、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)蛋白表达。starbase网站与双荧光素酶活性实验分析miR-145-5p和MRGBP的靶向关系。共转染anti-miR-145-5p和si-MRGBP,并建立细胞凋亡模型,观察低表达MRGBP对miR-145-5p低表达诱导的晶状体上皮细胞凋亡模型中SRA01/04细胞增殖和凋亡的影响。结果与对照比较,凋亡模型晶状体上皮细胞SRA01/04中miR-145-5p表达量、C-caspase-3水平、细胞凋亡率明显增加(P0.05),MRGBP mRNA、MRGBP蛋白表达量、cyclinD1表达量、细胞增殖率显著减少(P0.05)。低表达miR-145-5p或高表达MRGBP显著增加凋亡模型SRA01/04细胞的cyclinD1表达量、细胞增殖率(P0.05),显著降低C-caspase-3水平、细胞凋亡率(P0.05)。miR-145-5p靶向调控MRGBP表达。低表达MRGBP可以逆转miR-145-5p低表达对晶状体上皮细胞凋亡模型中SRA01/04细胞增殖、cyclinD1蛋白表达的促进作用,以及对细胞凋亡、C-caspase-3蛋白表达的抑制作用。结论 miR-145-5p通过靶向调控MRGBP基因的表达影响晶状体上皮细胞增殖和凋亡。

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