尼妥珠单抗联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的体外实验

【摘要】：目的探讨尼妥珠单抗(Nimotuzumab h-R3)联合顺铂对人肺腺癌细胞的增殖抑制作用。方法 h-R3和顺铂序贯作用于人肺腺癌A549细胞,试验分为5个组:A组(h-R3单抗,终浓度为200mg/L)、B组(顺铂单药,终浓度2.0mg/L)、C组(200mg/L的h-R3提前24h预处理后加用2.0mg/L的顺铂)、D组(200mg/L的h-R3和2.0mg/L的顺铂同时给予)及E组(空白对照组)。用MTT法观察各组药物对细胞的抑制情况,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫蛋白印迹法测定细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)水平。结果不同时点比较:各组随着细胞培养时间的延长,对细胞生长的抑制率逐渐升高(P0.01);组间比较:在24、48和72h中,B组、C组和D组对细胞生长的抑制率高于A组,C组高于B组,D组低于C组(P0.01),在所有时点中C组抑制率都是最高的。在不同的细胞周期中,各组对细胞生长的抑制率不同:在G0~G1期,A、B、C、D各组的抑制率均高于E组(P0.05),C组的抑制率仍最高,D组抑制率低于B组(P0.05);在S期,A、B、C、D各组抑制率低于E组(P0.05),C组的抑制率最低(P0.05),D组抑制率高于B组和C组(P0.05);在G2~M期,各组对细胞生长抑制率差异无统计学意义(P0.05)。D组中Cyclin D1蛋白表达量反而高于B组。结论提前应用h-R3干预能加强顺铂对A549细胞的杀伤作用,通过下调Cyclin D1水平将细胞抑制于G0~G1期;同时给予h-R3和顺铂时反而起到拮抗作用,更好地印证了临床上靶向药物应在化疗前给予。