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刺参基因组DNA的提取及RAPD条件的优化

常林瑞  孙振兴  李莉  李云玲  
【摘要】:以野生刺参为试验材料,探索了刺参基因组的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化,建立了刺参的优化反应体系和程序。反应体系总体积为25μL,各组分的含量为10倍缓冲液2.5μL,Mg2+(20 mmol.L-1)3μL,TaqDNA聚合酶(1 U.μL-1)1.5μL,dNTPs(10 mmol.L-1)2.5μL,随机引物(5pmol.μL-1)1μL,模板DNA(40 ng.μL-1)2.5μL。PCR循环程序为96℃预变性5 min;94℃变性0.5 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,35个循环;最后72℃延伸10 min。

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