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磷酸钙法将MMP-2,MMP-3双基因干扰载体转入HEK293T细胞的效率观察

焦德敏  于慧慧  张铸业  李宙阳  刘爱和  王彦刈  
【摘要】:检测用磷酸钙法能否将修饰后用于沉默MMP-2,MMP-3基因的慢病毒载体有效地转入到HEK293T细胞。利用磷酸钙法,MMP-2,MMP-3双基因干扰载体(MMP组)与对照质粒(对照组)被分别转染HEK293T细胞,在转染后的第24,48及72 h,通过计算绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞数的百分比来判断转染效率。转染24 h后,两组细胞均生长状况良好,荧光显微镜下观察,已有大量绿色荧光出现,计算MMP组转染效率为(91.5±6.2)%,对照组转染效率为(80.3±4.7)%;转染后48-72 h,两组感染效率均未见明显下降。与对照相比,插入了MMP-2,MMP-3shRNA模板序列的慢病毒载体没有降低磷酸钙法转染HEK293T细胞效率,反而有所增高。

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