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超高效液相色谱法检测6种探针底物代谢产物并评价人细胞色素P450同工酶活性

陆苑  谢玉敏  潘洁  黄勇  王永林  
【摘要】:目的:建立同时测定非那西丁(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、奥美拉唑(CYP2C19)、睾酮和咪达唑仑(CYP3A4)6种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,评价药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。方法:人肝微粒体与6种探针底物在还原系统NADPH的作用下,37℃共同孵育;以蛋白沉淀法处理样品,采用超高效液相色谱系统(UPLC-MS/MS),建立Cocktail混合探针,对药物的6种代谢物进行定量分析,并分析药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。结果:6种探针底物物代谢产物乙酰氨基酚(0.26~8.35μmol/L)、6-羟基氯唑沙宗(3.02~96.63μmol/L)、5-羟基奥美拉唑(0.10~3.09μmol/L)、羟基甲苯磺丁脲(0.15~4.88μmol/L)、6β-羟基睾酮(3.67~117.37μmol/L)和α-羟基咪达唑仑(1.64~52.37μmol/L)线性关系良好,各成分相关系数(R2)0.996,准确度为95.96%~103.10%,日内和日间精密度RSD(%)15%,提取回收率、基质效应RSD(%)11%,稳定性好。结论:UPLC-MS/MS准确、灵敏度高,可作为研究受试药物对CYP450酶影响及相关研究的分析测定方法。

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