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微小RNA-5586-5p在肝细胞癌中的表达及其对肝细胞癌侵袭、迁移的影响

姚博文  王亮  陈天翔  殷国志  
【摘要】:目的检测肝细胞癌中miRNA-5586-5p的表达情况,探究其与肝细胞癌临床病理特征和肝细胞癌病人预后的相关性,进而探究其对肝细胞癌细胞侵袭和迁移的影响。方法选取2010年1月—2013年6月西安交通大学第一附属医院进行根治性肝癌切除术的肝细胞癌患者100例。采用Real-time PCR法检测肝细胞癌组织和癌旁组织中miRNA-5586-5p的表达水平;采用合理统计学方法进行miRNA-5586-5p的表达水平与肝细胞癌临床病理特征的相关性分析及对肝细胞癌患者预后的影响。采用Real-time PCR法检测肝细胞癌细胞系中miRNA-5586-5p的表达水平,继而通过Transwell小室实验研究miRNA-5586-5p对肝细胞癌细胞侵袭和迁移能力的影响。采用Real-time PCR、Western blotting以及免疫组织化学检测miRNA-5586-5p下游潜在靶点肝细胞癌水通道蛋白9(AQP9)的m RNA和蛋白表达水平,利用Western blotting证实miR-5586-5p下调AQP9并通过miRNA-5586-5p-AQP9-AKT通路发挥促癌作用。结果 miR-5586-5p在肝细胞癌组织中的表达水平较癌旁组织显著上调(P0.01)。miRNA-5586-5p的高表达与肿瘤数量、血管侵犯、Edmondson分级和TNM分期显著相关(P0.05、0.01)。与mi RNA-5586-5p高表达者比较,miR-5586-5p低表达者的生存时间更长(P0.01)。miR-5586-5p在肝细胞癌细胞系中的表达均明显高于正常肝细胞(P0.05),经Transwell小室实验证实miR-5586-5p具有增强肝细胞癌细胞的侵袭、迁移的作用。miR-5586-5p可下调AQP9的蛋白表达量;且miR-5586-5p与AQP9蛋白表达呈负相关。结论 miR-5586-5p在肝细胞癌中为高表达,并显著促进肝细胞癌的侵袭、迁移能力,miR-5586-5p与AQP9的蛋白水平呈负相关,并且能够抑制AQP9表达和通过miR-5586-5p-AQP9-AKT通路促进肝细胞癌细胞的侵袭与迁移能力。

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