猪传染性胃肠炎与流行性腹泻病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用

【摘要】：为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与流行性腹泻病毒(PEDV)的快速鉴别诊断方法,本研究根据GenBank已登录的TGEV核蛋白(N)基因和PEDV膜蛋白(M)基因保守区域序列分别设计了1对特异性引物,以TGEV和PEDV混合总RNA为反转录模板,建立了TGEV和PEDV的二重RT-PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了应用检测,并对检测到的阳性样品进行克隆测序。结果表明,成功建立了TGEV和PEDV二重RT-PCR检测方法,该方法的检测灵敏度最低极限为10TCID50/mL病毒含量,重复性好,特异性强,可特异性地扩增TGEV和PEDV细胞培养物,但对ST细胞和其他7种病原对照扩增不出任何条带;对22份临床疑似TGEV和PEDV感染样品检测结果与测序结果完全一致。本研究成功建立了TGEV与PEDV二重RT-PCR检测方法,可适用于猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病的快速鉴别诊断。

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5	孙兵;;猪传染性胃肠炎的临床诊断与防治[J];中国猪业;2011年07期
6	苗得成;曲仁;;春季猪传染性胃肠炎的防治[J];畜牧兽医科技信息;2011年05期
7	王丽华;;猪传染性胃肠炎紧急治疗措施与预防[J];甘肃畜牧兽医;2011年04期
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9	周永峰;;猪传染性胃肠炎的诊治[J];畜禽业;2011年05期
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12	姜永庄;;猪传染性胃肠炎的综合诊治[J];黑龙江畜牧兽医;2011年14期
13	洪雪;;秋防猪传染性胃肠炎九措施[J];河北农业;2010年10期
14	郭瑶;汪平;董沁芳;程菊会;徐辉;丁先锋;郭江峰;姜永厚;;同时检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒和伪狂犬病毒连接酶检测反应-PCR基因芯片检测方法的建立[J];中国预防兽医学报;2011年07期
15	李敬;;猪流行性腹泻的防治[J];畜禽业;2011年08期
16	杨作丰;董娜;马建山;;猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻的鉴别诊断及综合防治[J];现代畜牧兽医;2011年06期
17	刘媛;左玉柱;范京惠;;猪传染性胃肠炎病毒S蛋白基因的克隆与表达[J];中国兽医科学;2011年08期
18	李金磊;王亚宾;崔保安;陈丽颖;张红英;李珂珂;魏战勇;;猪传染性胃肠炎病毒SYBR-Green I荧光定量PCR检测方法的建立[J];河南农业大学学报;2011年03期
19	黄新娟;;新生仔猪传染性胃肠炎与黄白痢合并感染的治疗[J];中国畜牧兽医文摘;2011年03期
20	张志榜;陈建飞;时洪艳;杨斌;石达;陈小金;冯力;;猪流行性腹泻病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J];中国预防兽医学报;2011年07期

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8	黄小波;曹三杰;文心田;;猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的初步构建[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集（下册）[C];2006年
9	张莉;翁崇鹏;毛娅卿;李永清;张培君;;猪传染性胃肠炎病毒河北分离株S蛋白基因的克隆分析[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集[C];2008年
10	任玲;李广兴;;猪传染性胃肠炎病毒S基因核酸疫苗免疫功能变化的研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年

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5	黄小波;猪传染性胃肠炎检测基因芯片与猪传染性胃肠炎病毒SC-H株N基因表达研究[D];四川农业大学;2006年
6	宋振辉;猪传染性胃肠炎病毒全基因组克隆及N蛋白的表达[D];四川农业大学;2006年
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8	葛俊伟;猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白不同抗原片段在重组干酪乳杆菌中的表达及其免疫学评价[D];东北农业大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库

前10条

1	刘邓;猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻快速诊断方法的建立及S基因的表达[D];新疆农业大学;2009年
2	黄海龙;猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻二联RT-PCR诊断方法的建立及初步应用[D];吉林农业大学;2004年
3	刘矿;猪传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒的分离、鉴定及部分基因序列分析[D];河南农业大学;2008年
4	任晓峰;猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因的克隆与鉴定[D];东北农业大学;2001年
5	唐丽杰;猪传染性胃肠炎病毒TH-98株N基因在大肠杆菌中的表达及重组N蛋白的纯化[D];东北农业大学;2002年
6	彭树英;猪传染性胃肠炎病毒S基因乳腺特异性真核表达载体构建的研究[D];西北农林科技大学;2004年
7	畅丹;猪传染性胃肠炎病毒胶体金免疫层析试纸条的研制[D];东北农业大学;2008年
8	刘春艳;三株猪流行性腹泻病毒的Envelope（Small Membrane，sM）编码基因的序列测定比较[D];中国农业科学院;2003年
9	张赟硕;抗猪传染性胃肠炎病毒S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[D];东北农业大学;2007年
10	王玉洁;猪传染性胃肠炎M基因的克隆及序列分析[D];西北农林科技大学;2004年

中国重要报纸全文数据库

前9条

1	刘俊辉;猪腹泻时该咋办[N];湖北科技报;2002年
2	俞正玉林继煌;猪流行性腹泻[N];江苏农业科技报;2004年
3	李顺华;猪传染性胃肠炎的诊治[N];云南科技报;2002年
4	武道广;猪传染性胃肠炎的防治[N];中国畜牧报;2002年
5	王广庆;猪传染性胃肠炎的病因及防治[N];中国畜牧报;2003年
6	刘延年;初产母猪为何死胎多[N];中国畜牧报;2002年
7	李连任;规模化猪场病毒性腹泻的防治[N];中国畜牧报;2004年
8	本报记者程鸿飞;免疫鸡卵黄抑制SARS病毒[N];农民日报;2003年
9	冯力　张晓鹏　记者　李丽云;二联灭活苗5年创效超10亿[N];科技日报;2005年

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